Комбинированное ружьё МП-251 12/.308 Win | Русский охотничий портал
В традиционной русской охотничьей литературе к двойникам традиционно сложилось презрительное отношение, как к не охотничьему оружию. Однозарядный дробовик, совмещённый на одном прикладе с однозарядной же винтовкой. Тяжело, неказисто, дуплетом не выстрелишь. Ружья для лесных сторожей – вот приговор классиков русской охотничьей литературы.
АВТОР СТАТЬИ: АЛЕКСЕЙ ВАЙСМАННо я позволю себе наглость не согласиться с признанными авторитетами.
Много лет тому назад пошёл я с недавно приобретённым карабином по полям лис посмотреть – ни одной не видал, зато из бурьянов и травяного сора за утро четыре зайца поднялись, да все на верный выстрел. А что с карабином сделаешь? Только свистнуть вслед. Ну, держитесь, косые! На следующий день пошёл с двустволкой топтать зайцев. Ни одного гада длинноухого не видал, зато в трёх разных местах лисы мышкуют внаглую, метров 150, не больше, вполне стрелять можно, да «стрелялка» в руках не та. Так у меня окончательно оформилась мысль о комбинированном ружье, чтобы и дробью навскидку, и из нарезного на далеко стрелять можно было.
Об импортных изделиях толщина кошелька не позволяла даже мечтать. Но не беда: в продаже уже появились ижевские двойники – «Тайга» с 12-м гладким калибром и калибром 7,62×54R нарезного ствола и её младший брат «Север» с гладким стволом 20-го калибра и мелкашечным нарезным. В итоге в хозяйстве у меня завелись «Север» с паянными ещё стволами и комплект МР-251-3.
Про «Север» я напишу в следующий раз, а сегодня – про МР-251-3, ружьё с тремя блоками стволов: гладкая – 12×76 + 12×76, комбинированная – 12×75 + .308 Win. и штуцерная – .308 Win. + .308 Win. У комбинированной и штуцерной пар стволы не паянные, на муфтах. О гладкой паре писать нечего, с ней ружье есть не что иное, как до боли знакомый Иж-27, а штуцерная пара в этом калибре и в этом исполнении – продукт сумеречного сознания. О ней писать надо отдельно, хочу в скором времени это сделать – рассказать о слабых местах ижевских штуцеров и комбинашек и о путях их исправления, тем более что теперь в руководстве ижевского концерна присутствуют вполне адекватные люди, которые, надеюсь, к моим размышлениям прислушаются.
Но вернёмся к двойникам.
Для начала скажу, что философия охоты с комбинированным оружием в Европе и в России разнятся до противоположности. В Европе охота с комбинированным оружием – это в основном охота парковая, загонная. А из загона и фазан летит, и лиса с зайцем бегут, и косуля скачет. Тут, конечно, двойник не котируется, нужна возможность полноценного дуплета. И не страшно, что дорогой и непрочный, с тонкостенными стволами. Условия охоты – самые щадящие.
У нас в России ровно наоборот. Комбинированное ружьё – это лесное пионерное ружьё для эксплуатации в жёстких условиях лазанья по лесным дебрям и буеракам. Где и зверь, и птица случаются, но случаются вдруг, через секунду скрывшись среди ветвей или за стволом дерева. Вот тут-то и нужны винтовка и дробовик, объединённые на одной ложе, и не беда, что однозарядные. Как много лет назад сказал мне дедок-егерь: «В лесу мне второй ствол без надобности. Порх! Скок! Я стрелил. Зверь иль лёг, иль убёг».
Сложилось так, что свой МР-251-3 я эксплуатирую и в хвост, и в гриву с осеннего сезона 2001 года именно с комбинированной парой стволов. Эту комбинацию «12-й калибр + .308 Win.», идентичную МР-94 «Тайга», я для простоты тоже буду называть «Тайгой». Что могу о ней сказать?
Ружьё тяжёлое – 3,7 кг, что для ходовой охоты не очень хорошо, но из-за уменьшенной длины стволов (60 см) оно имеет неплохой баланс, что отчасти искупает вес. Мне целый день таскать его по лесу не трудно, хотя я далеко не геркулес. Уменьшенная длина делает его вполне проходимым в лесу.
В целом ружьё сделано очень по-русски, т. е. крепко, весьма брутально и с заметной нелюбовью к потребителю. Тонкого ружейного эстета «Тайга», вызывающая своим внешним видом однозначно сантехнические ассоциации, запросто может шокировать. Но она сделана не для того, чтобы на неё любоваться, а чтобы верно служить в любых условиях. С этим у неё оказалось всё в порядке, правда, после некоторых доделок. Так, меня совершенно не устраивали имеющиеся прицельные приспособления. Приклад у «Тайги» от дробового ружья, рассчитан на прицеливание по планке, а на комбинированной паре мушка расположена на высоком основании, и щиток прицела своими размерами напоминает щиток пулемёта «Максим». Прорезь узка. Мушка тупо даётся на глаз. Линия прицеливания поднята, и прикладка сильно отличается от прикладки при стрельбе из дробового ружья: приходится щёку от гребня приклада поднимать. Всё это делает дробовую стрельбу навскидку почти невозможной. Мушка регулируется по высоте, что на двойнике совершенно лишнее. Щиток и мушку я переделал «на коленке» в меру своих возможностей. Щиток срезал по высоте ровно в два раза и пропилил новую прорезь немного шире штатной. Мушку выбросил, а её основание срезал по высоте вдвое же. В оставшейся части посередине пропилил продольный паз, в который вклеил самодельную флюомушку, которая потом при пристрелке была опиловкой подогнана по высоте. Такая переделка заметно снизила линию прицеливания и позволила целиться, не изменяя прикладки по сравнению с дробовым ружьём. Результат – удачные выстрелы навскидку, в том числе и в сумерках, и на раннем рассвете. Например, по удирающему по земле глухарю-подранку. Ещё «на полу» вполне темно было. Небо светлело, и мечущийся глухарь скорее угадывался, мелькая между деревьями, как чёрный кот в тёмной комнате, а мушка горела звёздочкой. Выстрел навскидку с 38 шагов положил его на месте.
Выглядит мушка после переделки вот так.
Имеющееся на «Тайге» штатное основание под кронштейн оптического прицела типа «ласточкин хвост» шириной 12 мм – это позавчерашний день. На родное основание была насажена планка Вивера, что позволило без проблем снимать-надевать прицел, не беспокоясь о повторяемости его установки. Это очень важно, так как при лесной ходовой охоте с двойником нормальное положение прицела – в кармане. При быстрой близкой стрельбе он только вреден. В случаях же, когда нужна оптика, практически всегда есть время установить прицел.
Сейчас, после описанного выше тюнинга, моя «Тайга» выглядит вот так.
Разумеется, доводки потребовал спусковой механизм, доставшийся от дробовика. Пришлось немного уменьшить угол самозатяга шептала нижнего ствола и все сопрягающиеся поверхности заполировать. Это заметно снизило усилие спуска нарезного ствола без риска самопроизвольных выстрелов.
Мне повезло: у комбинированной пары мне не пришлось заморачиваться сострелом стволов. На 100 метров средняя точка попадания гладкого ствола (пуля Полева, стрельба с упора с 4-кратной оптикой) ушла по сравнению с СТП нарезного ствола на 15 см на 8 часов. Меня это вполне устроило, так как стрелять дальше 50 метров из гладкого ствола я не собираюсь, а на этом расстоянии отклонение СТП не выходит за пределы убойной зоны живущих у нас копытных, для дробового же выстрела это и вовсе никакого значения не имеет.
На «Тайге» моего племянника пришлось поднимать СТП нарезного ствола. Так как запасных роликов для механизма в комплекте к ружью никто никогда не видал, то мы, разжимая стволы большой отвёрткой, подкладывали под ролик кусочки безопасного бритвенного лезвия, пока СТП не сошлись. С тех пор прошло уже больше 10 лет. Кусочки лезвия от стрельбы не выпадают, наверное, присохли там на литоле.
Но вообще-то, сострел стволов на отечественных двойниках (и штуцерах, кстати, тоже) – больное место. Механизм сострела отвечает своему предназначению только на 25%. Точку попадания нарезного ствола по отношению к дробовому можно только поднять, увеличив диаметр ролика, распирающего стволы, или покрутив винт домкратика, в зависимости от исполнения узла. Теоретически можно и опустить, заменив ролик или вовсе его убрав, так как по задумке конструкторов нарезной ствол имеет небольшой погиб с горбом вверх. Но, к сожалению, на деле такой погиб есть далеко не у всех экземпляров. С изменением положения СТП по горизонтали вовсе беда. Такой возможности не предусмотрено от слова совсем. Но то, что не решили конструкторы, решено народными умельцами. Энтузиастами «Тайги», которых очень много, разработан, неоднократно воплощён в металле и опробован на деле механизм сострела стволов, позволяющий вносить корректировки и по горизонтали, и по вертикали. Этот механизм подробно, с чертежами, описан на форуме Guns.ru в ветке, посвящённой «Тайге», одной из самых длинных и активных в этом разделе форума.
Его описание с разрешения изобретателя я тоже надеюсь вскорости дать на страницах журнала, излагая описание слабых мест и путей их изживания.
Что «Тайга» умеет на охоте? Довольно много. Бой гладкого ствола можно назвать очень хорошим. Толстенная труба даёт стабильный и резкий бой, что неоднократно было проверено и на дичи, и на врановых птицах.
Нарезной ствол гарантированно укладывается в 2 МОА валовыми барнаульскими патронами. Для охоты в большинстве случаев этого вполне достаточно. При стрельбе в комфортных условиях «подобранными» патронами ствол стабильно показывает кучность в 1 МОА.
За эти годы из «Тайги» было взято почти всё, что укладывается в линейку «от мыши до миши», за исключением самого «миши». Наиболее запомнившиеся выстрелы: сидящий заяц на дистанции 251 метр (расстояние по дальномеру), тетерев на 176 метров, глухари на разных дистанциях вплоть до 200 метров. Из дробового ствола брал вскочившего зайца, вполне успешно стрелял даже на вальдшнепиной тяге.
«Тайга» вполне соответствует требованиям, предъявляемым к ружью для лесной ходовой охоты в местах, где всякое «зверьё» живёт. Это ружьё позволяет брать всё, что видит глаз.
Мне приходилось сравнивать свою «Тайгу» и «Тайгу» племянника с имеющимися у знакомых импортными двойниками такого же класса – Sabatti Forest. Должен сказать, что внешне «иностранцы», конечно, сильно выигрывают, но по эксплуатационным качествам они уступают отечественным «Тайгам». Надо отметить, что «итальянцы» требуют не меньшей, но труднее осуществимой доводки спускового механизма и гораздо сложнее в пристрелке. А дороже – в разы.
***
Если вам понравилась статья — подпишитесь на канал.
Больше материалов об охоте есть на нашем сайте huntportal.ru
Отечественные комбинированные ружья: За и Против
INDEEZ
Стоит ли приобретать отечественное комбинированное ружье, чтобы его не доводить и не мучиться?
yurgen_spb
Привлекает в этом вопросе только!!! цена. Больше ничего.
Antti
INDEEZ
Стоит ли приобретать отечественное комбинированное ружье, чтобы его не доводить и не мучиться?
Несомненно стоит. Это ж просто счастье: не доводить и не мучиться.
shuher
Привлекает в этом вопросе только!!! цена. Больше ничего.да и та не очень)))
MrOleg
Цены на наши комбинашки действительно дармовые…
Сам вот крепко чешу репу в эту тему…
Есть у нас в коллективе отличная отечественная комбинашка.
Себе тоже прикуплю, но думаю через год, пока рассматривая рынок комбинашек, если честно так и не определился… Толь нашу почти даром толь ближайшую иномарку, но уже в 3 а то и в 4 раза дороже чем почти даром… Вот и думай…
Небыл бы разрыв в 3-4 раза, взял бы импорт не думая… Но вот нет дешёвых иномарочных комбинах 😞 Покрайней мере мне как то пока не попадались…
серый
Почему из отечественых расматривают только Иж ? Есть МЦ и она уже не дармовая 😊
TSV
MrOleg
Но вот нет дешёвых иномарочных комбинах 😞 Покрайней мере мне как то пока не попадались…
дешевых это сколько?
с рук продавали как-то за полтинник в разделе продаж
новые Сабатти Зверобой продавал. примерно за 65-70
на витрине у них до сих пор наверное висит немного дешевле вертикалка 20х76/223 сданная кем-то. владелец передумал и выставил.
MrOleg
Втом то и дело нашь МР стоит до 20ти… Самые дешёвые иномарки которые мне попадались это 50 — 60, енто учитывая что мне нужна комбинаха в варианте 12Х70/76 на 308… Енто ещё сужает список возможных вариантов… То что мне помню понравилось из импорта енто приблизительно в районе 70 — 80К…
А МЦх в живую не видел… В магазах тоже по этому для меня МЦ енто, что такое из разряда ружа с обложки журнала, больше нигде их не видно… (мифическое ружо)
серый
А МЦх в живую не видел… В магазах тоже по этому для меня МЦ енто, что такое из разряда ружа с обложки журнала, больше нигде их не видно…Ны выставке в Гостинном посмотрите. Странно обсуждаем цены или отечественные комбинированые ружья 😊? Почему отечественное, хорошо сделаное ружье должно стоить дешевле какого нибудь Саббати?Другое дело что делать у нас ничего нехотят, хотят лишь только получать 😊e
MrOleg
Никто не спорит не должно… Проблемма в другом что МЦ для меня лично не понятно как продают, коли их в магазинах нет… Ну посмотрю я на это ружо при возможности в гостинном дворе, а дальше что??? НА заводе заказывать? Других вариантов не видно…
Но суть вопроса в другом, в коллективе я уже упоминал есть хорошенький ижак, проблем с ним нет, точен для дистанций комбинах, по этому и добычлив… По этому как то и задумался… ИЖ стоит в несколько раз дешевле любой иномарки, а стоят ли иномарки того что за них просят? Если честно не приходилось стрелять с комбинах импортного производства, вот и посещают мысли дурные из разряда, нафиг импортная? Если и нашь иж вполне вменяем? Может в чём и не прав, я не эксперт в данной теме, но просто мысли в слух. .. Понимаю что дёшево хорошо быть не может, но нет опыта общения с импортными комбинахами, по этому не могу сказать насколько оправданна их цена…
Очень интересно если бы владелец нашей и импортной комбинахи, как пользователь разложил бы всё по полкам, о плюсах за которые нужно будет переплатить… А то сплошные сферические кони в вакуме из разряда старой фразы, дороже значит лучше…
серый
но нет опыта общения с импортными комбинахами, по этому не могу сказать насколько оправданна их цена…Тогда стоит этот опыт приобрести. Поверьте на слово — в сторону ИЖа больше смотреть незахочеться. Даже не имея того или другого- почитайте форум. Темы про Иж-94 и импортные комбинированые. Выводы сделайте сами.
MrOleg
Да не раз уже перечитал… Основная тема жалоб и нововведений, типо хочу сострел гладкого с нарезным чуть ли не на 100 метров. .. Енто мне не понятно, ну ниразу не попадались мне такие задачи… На то она и комбинаха, что бы с гладкого на коротке, а дальнии на нарязном, на оптике… Гладкий до 50 с открытого должен класть пулю как двудулка, я считаю что больше ентого требовать не нужно, что чаще всего и наблюдаеться, нарезной, максимум до 300 метров, и то считаю что енто предел при хорошей и пристрелянной оптике… Другие нарекания на наши комбинахи из разряда типичных проблем с иномарками, но енто насколько я лично всё перечитал, может где и был невнимателен…
Если обладаете данным опытом, поделитесь плиз, а то если честно ну не удалось мне изучив раздел «глазами владельца» составить полную для себя картину про импортные комбинахи, или уж ткните конкретной ссылкой, а то перелопатил уже прилично и так толком и не понял очевидные плюсы импора в данном разрезе… В гладких стволах мне ента тема уже давно понятна, и по опыту стрельбы и так же эту информацию спокойно можно разложить почитав форум. С комбинированными должна быть подобная аналогия, но пока не нашёл 😞
серый
Стволы ОБЯЗАНЫ стрелять в одну точку на определенной дистанции- комбинированое ружье имеет несколько стволов и несмотря на то что задачи у них могут быть разные, страховать друг друга они должны.
http://guns.allzip.org/topic/2/364611.html в помощь
MrOleg
Моё мнение на коротке нарезным всегда подстрахуешь гладкий, а на дальнеке, страховаться гладким??? Ну тогда лучше с штуцерной парой ходить, или чистым карабином 😊 Хотя может и не прав…
Спасибо за ссылку обязательно изучу…
Ссылка весьма мне в тему…
Огромное спасибо…
kolemik
Почему отечественное, хорошо сделаное ружье должно стоить дешевле какого нибудь Саббати
Скорее вопрос надо ставить так:
Почему нет отечественного ружья, сделанного на уровне Саббати. Сделанного рабочими, получающими российскую, а не итальянскую зарплату. Попавшего в магазин без астрономических ввозных пошлин. И стоящего, соответственно, дешевле означенного итальянского. Почему? Не даёт ответа…
TSV
потому что еще ничего не сделав, в цену ружья закладывают бонусы и большие зарплаты для начальства. а то в наглую мерс представительский заломят. вместо того чтоб покупать с дохода
при этом работяге зарплату дадут чирик в лучшем случае. а то и пятерой отделаются
вот и результат
серый
Почему нет отечественного ружьяПотому что нет самой культуры производства комби, потому что нет производства как такового на уровне которое должно быть. То что есть назвать комбинированым ружьем язык неповорачиваеться. Нет Российских комбинированых ружей как таковых- были да видать вышли 😊
felixs
У меня есть
ИЖ94 «Север» 20х70\22ЛР 94г. в буке, паянный. Сделан РУКАМИ, претензий нет.
ИЖ94 «Север» 20х76\5.6х39 2003г. орех. Претензий нет, крестит по вертикали, что ЕСТЕССТВЕННО. Метров на 70-80 пуля ГУАЛАНДИ попадает примерно туда же,что и нарезной.
Иж94 7.62х39\12х70,96г орех, паянный, сделано очень аккуратно, претензий по сострелу нет, была проблема с осечками нарезного ствола, вылечили.
ИЖ94 223кал»Экспресс»,2001г,орех, долго с ним мучились, в результате верхний ствол стреляет стабильно ,нижний точно под ним в 4-5 см,с небольним разбросом, вывод -пристрелять оптику по нижнему стволу на 100м,а с верхнего стрелять по марке на бОльшую дистанцию без поправок. Кандидат в будующем, наверно,на достволение, т.к без сменных стволов «Экспресс» не интересен.
МР251-03,3 блока стволов, полный комплект в 308кал, 2000г.в ,орех. Все стреляет куда надо, включая штуцерную пару, заменил только приклад под себя от ИЖ39.
ИЖ94 «Тайга» изначально 7.62х54\12х70,добавлены стволы 223рем\12х76,7.62х39\12х76,30-06\12х76 и гладкая пара 12х76,к вновь изготовленным претензий нет, пришлось только пристрелять по новой открытый. С первоначальной парой была проблема -ружье безбожно крестило по горизонту, лечили поворотом дульной муфты, ружье стало стрелять нормально, но сильно нависал целик в одну сторону ина глаз было видно завал набок мушки. После отправки в ремонт на достволение, было пожелание мастерской заменить муфту, каково было мое изумление, когда увидел что весь ремонт был в следующем -погнули гладкий !! ствол в месте межствольной муфты, в результате мушка и целик встали ровно. Честно говоря неожиданное решение, пострелять еще руки не дошли…
ТОЗ 34 5.6\28 не знаю зачем взял, надо продать. Так ,оружие промысловика. Куда то стреляет, наверно попадает.
У кого нибудь есть еще столько отечественных комбинашек на форуме в НАЛИЧИИ?
С ув.
FalconVS
INDEEZ
Стоит ли приобретать отечественное комбинированное ружье, чтобы его не доводить и не мучиться?
В 2000 году взял МР-251 (3 комплекта стволов, нарезной 308), ничего с ним не делал, кроме установки оптики, в 2002 году на охоте (месяц в приполярном Урале) устанвил личный рекорд из комбинашки — на 96 выстрелов — 1 промах. Тетерева и глухари пуля, дробь на утей.
До сих пор с ним хожу.
Вопрос — чем плохо это ружьё?
MrOleg
Вот они два полюса… Уверен, что истинна находится посередине…
kolemik
По-поводу отечественных ружей/комбинашек…
На выставке в гостинном дворе ни на стенде ИЖа, ни на стенде МЦ нельзя взять в руки оружие — оно всё за стеклом. Я вот ни разу в жизни не держал в руках иж-27, не говоря уже о 94-м или артемиде. Ничего не могу сказать об их весе, баллансе, удобстве… Зато перещупал массу импортных комбинашек, из которых мне по карману только CZ и Sabatti. Думаю, что и в случае покупки комби я буду ориентироваться на тех, кто ближе к покупателю. Пусть даже придётся за это переплатить.
А истина она действительно где-то посередине… Может быть в тройниках? 😊
Дядя Леша
с 2000 года владею комплектом МР-251-03 (три пары стволов: 12Х76 +12Х76; 12Х76 + 308; 308+308). До штуцерной пары (оба нарезные) толком так и не дошли руки, бо нет в ней надобности. Комбинированная пара стреляет куда надо, ничего с ней не делал. На 100 метров гладкий ствол кладет пули Полева на 18 см ниже и левее (на 7 часов) по сравнению с нарезным. Меня это не колышит нисколько. Самое рабочее и добычливое ружье в моем арсенале. Бито из нее много чего от рябчика до лося.
У племянника на его Тайге нарезной билд заметно ниже гладкого. Вылечили тем, что под ролик подлрожили два кусочка безопасного лезвия. Его ружье в работе уже восьмой год, все стреляет как надо и куда надо.
Имею Рядовой паянный Север из первых вариантов. Гладкий ствол бил сильно в сторону от нарезного. Вылечил аккуратной опиловкой кромки дульного среза с противоположной стороны.
У друга недавно купленный Север со стволами на муфтах. Стволы бьют по горизонту практически идеально. На 50 метрах гладкий бьет пулей Полева на 15 см выше нарезного, а на 100 метроах практически в ту же точку, что и нарезной высокоскоростными патронами.
Возиться у всех пришлось с доводкой спусков у нарезных стволов. Но это не страшно.
Да, наши ружья дубоваты и хуже сделаны, чем иностранцы, но их не жалко трепать в условиях довольно жесткой эксплуатации. Я могу собрать денег и купить себе ружье за 70-80 тысяч, но шарахаться с ним по ебеням мне не по карману.
——————
С дружеским прицелом, Дядя Леша
серый
Я могу собрать денег и купить себе ружье за 70-80 тысяч, но шарахаться с ним по ебеням мне не по карману.Это по ходу самая обоснованая фраза при выборе отечественного комбинированого ружья 😊
Дядя Леша
серый
Это по ходу самая обоснованая фраза при выборе отечественного комбинированого ружья 😊
Да, конечно, особенно, если учесть, что среляют наши ружье не хуже и не лучше «иностранцев».
——————
С дружеским прицелом, Дядя Леша
серый
Да, конечно, особенно, если учесть, что среляют наши ружье не хуже и не лучше «иностранцев».Есть с чем сравнивать? 😊 Судя по Вашему предыдущему посту не все так гладко 😊 Единственно что мне понравилось так это фраза-
Меня это не колышит нисколько.Признаюсь меня бы это очень сильно колышило 😊 — ибо летит в ту сторону для меня неприемлимо.
Стрелял как из ИЖ-94, так Золи, ну и конечно Блазер 😊- Иж бы непосоветовал даже врагу 😊
TSV
kolemik
На выставке в гостинном дворе ни на стенде ИЖа, ни на стенде МЦ нельзя взять в руки оружие — оно всё за стеклом. Я вот ни разу в жизни не держал в руках иж-27, не говоря уже о 94-м или артемиде.
сходил поглядел. зашел на стенд Ижевска
достали Артемиду в 45-70, покрутил ее в руках
не такая уж и топорная, как показалось в начале
за ее цену (меньше 20 тыс) потянет даже это исполнение
но патрон здоров, а в калибре 9,3х74 не делают и пока не планируют
типа, заявок нету от покупателей
45-70 и 30-06 сделаны были для американцев (а не для нас)
на стенде Питера Хофера все тащатся от вида ММГ патрона 4 калибра и от ружбайки для нее
слонопотам от одного только ее вида должен упасть в обморок 😊
вес килограмм 15
шел с целью поглядеть на комбинахи и штуцеры
из нижнего диапазона все примерно одинаковые. и ни на одном стенде не было штуцера под девятку!! все дружно приволокли под 8мм маузер
на стенде CZ зацепил взглядом вертикалку 20магнум. аккуратно сделанная вещь. мне понравилось. аппарат для работы, без всякого выпендрежа и хохломы.
на стенде Нижегородцев цапнул с крюков Марлина в 45-70 (средний). классная зверюга. но патроны похоже кроме них никто не продает. (раньше еще были у Кольчуги)
там же у них висел экземпляр для настоящих браконьеров — Браунинг со скобой Генри, снимающимся стволом и магазином снизу.
на стенде телескопов Мэд покрутился вокруг аппарата на штативе с управлением (синего) с фокусным 2000 мм. в торец вставляется переходник для камеры или фото и можно снимать, при этом окуляр сбоку свободен и можно наводиться. плюс азимутальная поворотная система. стоит что-то порядка 40тыс. варминтерам для записи попаданий самое оно 😊
заглянул на стенд Зброяра
висит классная игрушка в 308 калибре. с кожухом.
складной приклад, регулировки затыльника и щеки, большая рукоять с ограничителем. ложа из алюминия сделана очень аккуратно
ствол Шилен или Лотар. вообщем, вещь весьма достойная
выбор калибров довольно широк
со слов представителя винтовки будут продавать в Москве примерно по пятере бакинских. и не нужно никуда переться и маяться с таможней.
Дервиш! скоро у тебя появятся конкуренты с подобной винтовкой 😊
задержался, поговорили о железе и об вообще
культурное заведение, а ни у кого не видел на стенде манка на лису (крик зайца). одни сплошные гуси. их чуть разбавляют олени и прочие
серый
На выставке в гостинном дворе ни на стенде ИЖа, ни на стенде МЦ нельзя взять в руки оружие — оно всё за стеклом. Я вот ни разу в жизни не держал в руках иж-27, не говоря уже о 94-м или артемиде.Это сделано ради потенциальных покупателей- ни к чему получать занозы сразу 😊 😊 😊
kolemik
TSVЯ её не то что зацепил, я её покупать буду к следующему сезону. Как раз сертификацию они пройдут. Вертикалка знатная, хоть и стволы от HUGLU. Ориентировочная стоимость обещана 20 тыр!!! В 12-м калибре тоже будет.
стенде CZ зацепил взглядом вертикалку 20магнум
TSVКстати сразу за стендом CZ продают много разных манков
ни у кого не видел на стенде манка на лису (крик зайца)
TSV
kolemik
Кстати сразу за стендом CZ продают много разных манков
был у них
купил там писк мыши (махонький зеленый пластиковый свисток)
были манки с мордой лисы, рыси на обложке, и еще кого-то
но звуки были визг крысы.
зайца (rabbit) в списке не было
потом погляжу в другом месте. где-то попадалось что были в оружейных магазинах. поищу.
за чезеткой в Питер переть не очень бы хотелось
проезд туда и обратно и смысл теряется брать чезетку. Хуглу здесь этих денег стоит
mobidik12
. Ориентировочная стоимость обещана 20 тыр!!!Подозрительно недорого 😊.Сборка в турции?
С Уважением.
kolemik
mobidik12клянутся и божатся, что в Чехии, но всё-равно подозрительно…
Сборка в турции?
TSVНе нужно. Они будут в ново-обнинске и ещё где-то, но я забыл. Можно им позвонить и уточнить.
за чезеткой в Питер переть
980218TSKIB
А МЦх в живую не видел… В магазах тоже по этому для меня МЦ енто, что такое из разряда ружа с обложки журнала, больше нигде их не видно… (мифическое ружо)почему мифическое
spirikraft
Выпускают ли еще ТАЙГИ 7.62х54 или не стоит заиорачиваться и взять c 308win?
Всю плешь проели муки выбора.
iluhaM
spirikraftЕсли есть знакомый прапор, то 7.62х54, если нет — 308
Выпускают ли еще ТАЙГИ 7.62х54 или не стоит заиорачиваться и взять c 308win?
980218TSKIB
Если есть знакомый прапор, то 7.62х54, если нет — 308во первых военные(боевые)патроны ЖУЙНЯ, нет никакого останавливающего действия, и биметалл (стальная оболочка покрытая томпаком)интенсивно изнашивает ствол, а во вторых за боевые патроны можно кучу неприятностей заиметь
spirikraft
Если есть знакомый прапор, то 7.62х54, если нет — 308
Их (ТАЙГИ) прапоры выпускают? Мосинский патрон в продаже без проблем, а вот ТАЙГУ под него я что-то не встречал.
980218TSKIB
а вот ТАЙГУ под него я что-то не встречал.есть такие, у меня знакомый себе такую купил.
http://baikalinc.ru/ru/company/67.html
iluhaM
980218TSKIBC первым пунктом согласен, шьют.
во первых военные(боевые)патроны ЖУЙНЯ, нет никакого останавливающего действия, и биметалл (стальная оболочка покрытая томпаком)интенсивно изнашивает ствол, а во вторых за боевые патроны можно кучу неприятностей заиметь
Насчет износа ствола, никто не доказал, вроде, тем более на нашем оружии они хромированы.
Насчет неприятностей — тут уж как повезет, кто то в магазин и не ходит вовсе
Вишер
На загонную хороший егерь не пустит. Несколько годов назад какой-то ухарь БЗТ-шкой покалечил загонщика(через березу). Я тогда работал егерем, и у всех мосинопатронных охотников осматривал патрон. Кто не хотел показывать, оставался в машине водку жрать.
Комбинашки ИМХО весчь неплохая, я бы купил нашу, потому что ее жаба позволит трепать по лесам и болотам. Если вы ездите на охоту в коллективе состоятельных людей, купите иномарку. Перед коллективом за нашу будет неудобно.
Я иногда чиню ружья, делаю напилинг и пр. Поверьте на слово, чего только не приходилось чинить, а иностранцы уже не стесняются пихать нам свои неликвиды, поплачут , но возьмут. Ижмех последнее время в качестве идет, у меня работы меньше.
greenbars
Вот все говорят, «по ибеням таскать жалко». У вас ружья, которые не жалко таскать, уже такие покоцаные, что глядя на них эта фраза рождается? Или так, на автомате?
БИДЖО
greenbarsПосле охоты всегда нахожу новые «коцки». А разве по другому бывает?
Вот все говорят, «по ибеням таскать жалко». У вас ружья, которые не жалко таскать, уже такие покоцаные, что глядя на них эта фраза рождается? Или так, на автомате?
denis.k
Я когда комбинаху выбирал перелапал много иномарок, некоторые были откровенно топорны только с лоском, полное разочарование пришло после сравнения отстрела некоторых с ижом ,вобщем есть такие за которые воще не понял за что там такие деньги просят, в итоге взял севера и по сей день доволен как слон .
greenbars
БИДЖО
После охоты всегда нахожу новые «коцки». А разве по другому бывает?
Вот и я говорю. Молиться на него, что ли?
greenbars
denis.k
Я когда комбинаху выбирал перелапал много иномарок, некоторые были откровенно топорны только с лоском, полное разочарование пришло после сравнения отстрела некоторых с ижом ,вобщем есть такие за которые воще не понял за что там такие деньги просят, в итоге взял севера и по сей день доволен как слон .
Можно по-конкретней? Интересно по конкретным производителям.
серый
Рабочие оружие без следов » работы»- ну не как не может быть 😊 Ну а желающим сохранить свое ружье в первозданном состоянии можно только посоветовать не выходить с ним из-за стола 😊 😊 😊
denis.k
Скорей по моделям, потому как производителей представленных тут у нас по пальцам одной руки можно посчитать, из них в наличие большинство было только гламурные экспрессы с африканской хохломой. Не понравилось много меркелей не по виду не в руке, не впечатлили и итальянцы не чем и стрельбой тоже . Понравились только хейм и фабарм, но не то что было нужно. В итоге на все фантазии был положен болт, а что и как сейчас с этим я не в теме.
SteelKnight
Отзывы в сети об отечественных комбинашках не совсем лестные. Сам не имел.
Дядя Леша
серый
Признаюсь меня бы это очень сильно колышило 😊 — ибо летит в ту сторону для меня неприемлимо.
Стрелял как из ИЖ-94, так Золи, ну и конечно Блазер 😊- Иж бы непосоветовал даже врагу 😊
О вкусах не спорят, но обсуждать снос пули из гладкого на 18см на дистанции в два раза превышающей разумно допустимую для такой стрельбы на мой взгляд — снобизм и пижонство.
——————
С дружеским прицелом, Дядя Леша
Дядя Леша
TSV
зайца (rabbit) в списке не было
Вообще-то «rabbit» — это кролик, а заяц на вражьем языке будет «hare».
Манок на кролика нам «как в русской бане лыжи». 😉
——————
С дружеским прицелом, Дядя Леша
серый
Дядя ЛешаЗачем тогда пристреливать на данную дистанцию да еще делать какие то выводы?О вкусах не спорят, но обсуждать снос пули из гладкого на 18см на дистанции в два раза превышающей разумно допустимую для такой стрельбы на мой взгляд — снобизм и пижонство.
Дядя Леша
серый
Зачем тогда пристреливать на данную дистанцию да еще делать какие то выводы?
Это не пристрелка, а проверка боя. Посмотрел как летит и успокоился.
Пристрелка — совсем другое дело.
——————
С дружеским прицелом, Дядя Леша
серый
Дядя ЛешаПонятно. Недопонял сразу 😊Это не пристрелка, а проверка боя. Посмотрел как летит и успокоился.
Пристрелка — совсем другое дело.
TSV
Дядя Леша
Вообще-то «rabbit» — это кролик, а заяц на вражьем языке будет «hare».
Манок на кролика нам «как в русской бане лыжи». 😉
манок не НА кролика, а С визгом кролика 😊
мне надо лису позвать. в гости 😀
Дядя Леша
TSVманок не НА кролика, а С визгом кролика 😊
мне надо лису позвать. в гости 😀
Да хоть до хрипа обзовись кроликом-то! Для нашей лисы кролик- не объект охотыю. Она ни самого дикого кроля, ни егойного крику не знает.
——————
С дружеским прицелом, Дядя Леша
TSV
а чем же тогда ее звать?
биографию в рупор читать, что ли ? 😊
завтра где будешь?
пулелейку 9.3 могу подвезти на метро. пока все-равно не пользую. не на чем. опробуй как пойдет
сайзинг от ЛИ тоже есть. 367
mobidik12
а чем же тогда ее звать?писк мыши ,раненный заяц (жуткий звук),во время гона голос лисицы/лисовина ?
FalconVS
iluhaM
C первым пунктом согласен, шьют.
Насчет износа ствола, никто не доказал, вроде, тем более на нашем оружии они хромированы.
Ошибаетесь.
У меня МР-251 нарезные стволы не хромированны.
SteelKnight
нарезные стволы не хромированныВот так всегда власть пытается ослабить гражданское оружие по сравнению с боевыми аналогами.
kolemik
власть пытается ослабитьАга, всё на власть перекинем, конечно. Может просто на заводе кто-то исключил операцию хромирования так как военной приёмки гражданскому оружию не грозит? Если у вас начальник цеха относится к категории «власть», то тогда да, конечно… А так, власть тут не причём — всё мы сами, граждане 😛
FalconVS
kolemik
Ага, всё на власть перекинем, конечно. Может просто на заводе кто-то исключил операцию хромирования так как военной приёмки гражданскому оружию не грозит? Если у вас начальник цеха относится к категории «власть», то тогда да, конечно… А так, власть тут не причём — всё мы сами, граждане 😛
В основе МР-251 лежат снайперские стволы. А насколько я знаю из печати — хромирование снижает кучность, хотя повышает живучесть.
серый
В основе МР-251 лежат снайперские стволы.😊 😊 😊
Вот так всегда власть пытается ослабить гражданское оружие по сравнению с боевыми аналогами.😊 😊 😊
Мужики прекратите пороть чушь 😊
kolemik
По поводу хромирования и кучности… Смотря какое хромирование.
Если хромирование делается «чтоб быстрее», то тогда, конечно, образуются всякие «утолщения», которые могут влиять на кучность, особенно в гладкоствольном оружии. Но если хромирование делалось на совесть, без лишней спешки, то результат будет иной.
Но Лобанов делает стволы из нержавейки и не парится. Так что на вопрос, что лучше «хром» или «не хром», правильным ответом вполне может оказаться что-то третье 😛
FalconVS
серый
😊 😊 😊
Мужики прекратите пороть чушь 😊
«Одной из таких снайперских винтовок стала магазинная СВ-98, созданная конструкторами Ижевского машиностроительного. Для стрельбы используются отечественные 7,62х54-мм патроны. Кроме того, разрабатываются варианты винтовок под стандартный винтовочный патрон НАТО 7,62×51 мм (.308 Winchester) и под патрон .338 Lapua Magnum. Это значительно повысит экспортные возможности винтовки.
Ствол винтовки «плавающего» типа закреплен в ствольной коробке. Он изготовлен способом холодной ковки. Канал ствола с четырьмя правыми нарезами, как и на большинстве спортивного оружия, с целью повышения кучности стрельбы не хромирован»
Просто на вскидку вырезка, но я эту фразу встречал часто в професиональной литературе. Я не спец, я просто запоминаю, что читаю.
серый
Я не спец, я просто запоминаю, что читаю.Читать можно все что угодно 😊 , но это не имеет никакого отношения к обсуждаемому в данной теме 😊 Даже с учетом того что наши ижевские умельцы имеют какие -то свои представления о СН оружии да и об охотничьем собственно тоже 😊Отсюда и рождаються уродцы которые пытаються выдать за охотничьи комбинированые ружья , про СН оружие пожалуй промолчу 😊И с теми и с другими народ мучаеться и пытаеться изменить что-то самостоятельно.
FalconVS
серый
Читать можно все что угодно 😊 , но это не имеет никакого отношения к обсуждаемому в данной теме 😊 Даже с учетом того что наши ижевские умельцы имеют какие -то свои представления о СН оружии да и об охотничьем собственно тоже 😊Отсюда и рождаються уродцы которые пытаються выдать за охотничьи комбинированые ружья , про СН оружие пожалуй промолчу 😊
Про хромирование и «снайперские стволы» я ведь не придумал, это не то в описании, не то в паспорте на мой МР-251 написано, приду домой посмотрю, но это точно.
серый
FalconVSСтранно что МР-251 не приняли на вооружение спецслужбы 😊 На заборе …. написано, а там трава растет 😊Про хромирование и «снайперские стволы» я ведь не придумал, это не то в описании, не то в паспорте на мой МР-251 написано, приду домой посмотрю, но это точно.
FalconVS
серый
Странно что МР-251 не приняли на вооружение спецслужбы 😊 На заборе …. написано, а там трава растет 😊
НаХ спецуре штуцер, скорей отбракованные стволы на него пустили, что бы повысить рентабельность производства. 2000 год — вся страна в ж…пе сидела, особенно оборонка, к коей ижмаш относится.
серый
FalconVSКак просто оказываеться навесить лапши на уши потребителям 😊скорей отбракованные стволы на него пустили, что бы повысить рентабельность производства. 2000 год — вся страна в ж…пе сидела, особенно оборонка, к коей ижмаш относится.
ALAM
черт, а я всегда считал что иж-мр и тигры-лоси-сайеги 😊,делаются на разных заводах.. 😊
Strelezz
FalconVSВ основе МР-251 лежат снайперские стволы. А насколько я знаю из печати — хромирование снижает кучность, хотя повышает живучесть.
.
Вона чё , Михалыч !!!
МР 251 кучность не грозит . Так что можно хромировать хоть дважды 😊
V1
SteelKnight
Вот так всегда власть пытается ослабить гражданское оружие по сравнению с боевыми аналогами.
Бугага. Дофига знаете «боевых» комбинашек. (Этот милитари фетишизм просто умиляет).
kolemik
По поводу хромирования и кучности… Смотря какое хромирование.
Совершенно точно. У меня в профайле кому интересно могут глянуть мишени м14 (кЫтай)и AIA М10 (неизвестно кто) обе с хромированными стволами (отстоеливались заводскими патронами без подбора).
Кронштейн ЭСТ ТН 30 мм Тайга на МР-251, ИЖ-94 Тайга, ИЖ-94 Север и ласточкин хвост 5,4 мм
Kpoнштeйн TH 5.4 (Taйгa) 30 мм пpeднaзнaчeн для ycтaнoвĸи paзличныx oптичecĸиx пpицeлoв нa глaдĸocтвoльнoe и нapeзнoe, a тaĸжe ĸoмбиниpoвaннoe opyжиe, ocнaщeннoe вepxним ĸpeпeжoм типa «лacтoчĸин xвocт» (пocaдoчный paзмep 5.4 мм) – ИЖ-94 «Taйгa», ИЖ-94 «Ceвep», штyцep МР-251 и тaĸ дaлee. Bыcoтa ĸpeплeния oптичecĸoгo пpицeлa – 41 мм oт cтвoльнoй ĸopoбĸи, чтo пoзвoляeт пoльзoвaтьcя вo вpeмя cтpeльбы ĸaĸ oптиĸoй, тaĸ и штaтным пpицeлoм opyжия.Kpoнштeйн TH 5.4 (Taйгa) 30 мм изгoтoвлeн из cтaли c нaнeceниeм твepдoгo изнococтoйĸoгo oĸcиднoгo пoĸpытия. Πpeдeльнo пpocт в иcпoльзoвaнии и гapaнтиpyeт нaдeжнocть ĸpeплeния oптиĸи нa opyжии. Фиĸcaция peзьбoвaя, 8 винтoв зaжимaютcя вopoтĸoм (ecть в ĸoмплeĸтe) и нe дoпycтят cмeщeния пpицeлa пpи cтpeльбe. За более детальной информацией о назначении, характеристиках, гарантии, покупке или доставке — звоните на телефоны нашего интернет-магазина товаров для охоты «Профоптика».
Установка кронштейна на оружие:
1. Вывернуть восемь крепежных винтов 5 и снять верхние охваты.
2. Вложить оптический прицел в кронштейн, сориентировав вертикальную ось (сетку) прицела, и закрепить его с помощью верхних охватов и крепежных винтов 5.
3. Освободить стяжные винты 3 и ввести направляющие кронштейна в крепление на оружии типа «ласточкин хвост» (гайки 4 расположить с левой от Вас стороны).
4. Затянуть гайки 4. Покачивая прицел, убедиться в надёжности его закрепления. С помощью подходящего «усилителя» затянуть стяжные гайки до упора.
5. Привести оптический прицел к нормальному бою в соответствии с инструкцией в паспорте.
Полные характеристики:
Бpeнд — ЭCT
Maтepиaл ĸopпyca — cтaль
Πoĸpытиe ĸopпyca — вopoнeниe
Kpeплeниe — диaм. 30 мм
Mapĸa opyжия — МР-251, ИЖ-94 Тайга, ИЖ-94 Север и ласточкин хвост 5,4 мм
Cтpaнa пpoиcxoждeния — Poccия
Гapaнтия пpoизвoдитeля (лeт) — 1
Гaбapиты в yпaĸoвĸe, мecтo 1 (мм) — 142 × 133 × 40
Bec нeттo (ĸг) — 0.24
Bec бpyттo, мecтo 1 (ĸг) — 0.25
Koнcтpyĸция — Moнoлитнaя (eдинaя бaзa)
Основные технические характеристики крепления ТН 5.4 (Тайга) 30 мм
Основные ТТХ:
Maтepиaл — Cтaль
Kpeплeниe нa opyжиe — «Лacтoчĸин xвocт» 5.4 мм – pyжья МР-251, ИЖ-94 «Ceвep», ИЖ-94 «Taйгa»
Цвeт — Чepный
Уcтaнaвливaeмoe oбopyдoвaниe — Oптичecĸиe пpицeлы
Физичecĸиe и эĸcплyaтaциoнныe xapaĸтepиcтиĸи:
Диaмeтp oxвaтa ĸoлeц, мм — 30
Bыcoтa ycтaнoвĸи пpицeлa, мм — 41
Гaбapиты — 91x60x44
Bec, ĸг — 0,24
Гapaнтия, лeт — 1
Комплект поставки:
Кронштейн ТН 5,4 (Тайга) 25,4 мм в сборе — 1 шт.
Г — образный ключ (вороток) — 1шт.
Упаковка.
ВЛИЯНИЕ КОЛИЧЕСТВЕННЫХ ХАРАКТЕРИСТИК НА ЭФФЕКТИВНОСТЬ АБЛАЦИИ МИОМ МАТКИ ФОКУСИРОВАННЫМ УЛЬТРАЗВУКОМ ПОД КОНТРОЛЕМ МАГНИТНО-РЕЗОНАНСНОЙ ТОМОГРАФИИ: ЦЕЛЕСООБРАЗНОСТЬ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ЗНАЧЕНИЙ ИНТЕНСИВНОСТИ МАГНИТНО-РЕЗОНАНСНОГО СИГНАЛА ОТ МИОМЫ НА Т2-ВЗВЕШЕННЫХ ИЗОБРАЖЕНИЯХ В КАЧЕСТВЕ КРИТЕРИЯ ПРИ ОТБОРЕ ПАЦИЕНТОК | Загвоздкин
Цель исследования – определить влияние количественных показателей на эффективность аблации миом матки фокусированным ультразвуком (ФУЗ) и оценить возможность их использования для отбора пациенток перед лечением.
Материал и методы. Ретроспективно проанализированы данные 67 процедур ФУЗ-аблации миом матки (67 пациенток, 94 миомы). Оценивались характеристики миом (стандартизированная интенсивность и неоднородность магнитно-резонансного (МР) сигнала на Т2-взвешенных изображениях (ВИ), максимальный диаметр, расстояние до кожи и до крестца во время ФУЗ, объем, неперфузируемый объем (NPV), МР-тип), энергия соникаций и возраст пациенток. Стандартизация значений интенсивности сигнала от миом проводилась по интенсивности сигнала от подвздошных мышц. Определялась корреляция между NPV и количественными показателями. Проведен ROC-анализ для выявления оптимального порогового значения интенсивности сигнала от миомы, необходимого для достижения NPV≥50%. Выполнено сопоставление МР-типа миом с NPV и значениями интенсивности сигнала.
Результаты. NPV миом непосредственно после ФУЗ-аб-лации составил 57,1 ± 22,5%. NPV для миом I МР-типа (n=67) равнялся 63,4 ± 19,7%, II типа (n=20) – 46,8 ± 19,5% и III типа (n=7)– 26,4 ± 21%. Различия между группами значимы (p<0,05). Выявлена значимая корреляция значений NPV и стандартизированной интенсивности МР-сигнала от миомы (R=-0,28, p<0,01). Значимой корреляции между NPV и другими количественными показателями не обнаружено. Миомы с интенсивностью сигнала ≤1,4 характеризовались NPV≥50% (чувствительность 72,7%, специфичность 71,4%, p<0,01, AUC 0,72). Выявлено различие значений интенсивности сигнала от миом разных МР-типов (p<0,05). Значения интенсивности МР-сигнала ≤1,4 характерны только для миом I МР-типа.
Заключение. Количественный показатель интенсивности МР-сигнала от миомы на Т2-ВИ может применяться в качестве дополнительного объективного критерия для прогнозирования непосредственных результатов лечения и отбора пациенток для ФУЗ-аблации. Хорошие результаты лечения миом матки (NPV≥50%) в большинстве случаев могут быть достигнуты при значении данного показателя ≤1,4.
Электроды МР-3C (2.5х350 мм; 1 кг) ВАТРА MRV251 — цена, отзывы, характеристики, фото
Электроды МР-3C ВАТРА MRV251 предназначены для сварки рядовых конструкций из углеродистых сталей во всех пространственных положениях шва, кроме вертикального «сверху-вниз», переменным и постоянным током обратной полярности.
- Тип Э46
- Диаметр, мм 2.5
- Марка электрода МР-3С
- Свариваемый материал углеродистые стали
- Покрытие рутиловое
- Вес, кг 1
- Вес, кг 1
Этот товар из подборок
Параметры упакованного товара
Единица товара: Штука
Вес, кг: 1,04
Длина, мм: 6
Ширина, мм: 36
Высота, мм: 2
Произведено
- Украина — родина бренда
- Беларусь — страна производства*
- Информация о производителе
Указанная информация не является публичной офертой
На данный момент для этого товара нет расходных материаловКронштейн ЭСТ 18МН
Кронштейн ЭСТ «18МН» предназначен для установки оптических прицелов на ружье «ИЖ-18МН. Может применяться и на другом оружии с верхней базой «ласточкин хвост» с шириной базы 9,5 мм. у основания — «ИЖ-94 Тайга», «ИЖ-94 Север» и т.д. Преимуществом кронштейна является наличие съемного стопора и возможность установки кронштейна на базу «ласточкин хвост», не имеющую захода.
Фото 1.
Кронштейна ЭСТ «18МН». Вид снизу.
Кронштейн изготовлен из стали. Выпускается в двух исполнениях: с кольцами 25,4 и 30 миллиметров (таблица 1).
Крепежный диаметр (D) |
Посадочный размер (b) |
Высота установки прицела (h) |
Высота кронштейна (H) |
Длина кронштейна (L) |
|
25,4 мм. | 9,5 мм. | 34 мм. | 49 мм. | 90 мм. | 230 грамм |
30 мм. | 9,5 мм. | 36 мм. | 54 мм. | 90 мм. | 260 грамм |
Рисунок 1.
Устройство кронштейна «18МН».
1 — стальной корпус. 2 — верхние охваты. 3 — стяжные винты. 4 — крепежные винты. 5 — стопор. 6 — прижимая планка.
- Вывернуть четыре крепежных винта 4 и снять верхние охваты крепления прицела 2.
- Вложить оптический прицел в кронштейн. По сетке сориентировать вертикальную ось прицела. Закрепить прицел с помощью крепежных винтов 4.
- Ослабить стяжные винты кронштейна 3 и установить кронштейн на «ласточкин хвост» оружия.
Если на оружии нет отверстия под стопор, то стопор 5 необходимо снять с кронштейна перед установкой на оружие. - Равномерно затянуть стяжные винты 3 с помощью ключа.
- Привести оптический прицел к «нормальному бою» в соответствии с инструкцией в его паспорте.
Комплект продажи: кронштейн в сборе, шестигранный ключ, упаковка.
Гарантия 12 месяцев.
Производство ООО «ЭСТ-ПРИМ», г. Тула.
Стальная гильза — Охотники.ру
Все больше и больше охотников сейчас приобретают отечественное и импортное нарезное охотничье оружие различных калибров. Наиболее доступно оружие калибра 7,62 мм и по стоимости, и по распространению.
фото: Семина Михаила
В любом отечественном оружии с клеймом «.308 Win» этот зарубежный патрон допустим. Но сейчас речь пойдет только о наших боеприпасах, а точнее, о недорогом патроне 7,62х51, выпускаемом Барнаульским заводом. Хотелось бы знать и ваше мнение об этом патроне, уважаемые читатели.
Карабин «Лось» всегда привлекал мое внимание сРазмышления о выборе карабинавоей неприхотливостью и сравнительно небольшим весом, а главное — ручным перезаряжанием. Уже был удачный опыт стрельбы из отечественного самозарядного карабина «Медведь» под патрон 9,3х53R с латунной гильзой, но хотелось приобрести «Лось».
Ручное перезаряжание карабина ставит охотника в сложное положение на охоте, но принуждает к точной стрельбе. Так появился карабин «Лось-7» под патрон 7,62х51, на стволе которого снаружи нанесена маркировка «.308 Win». Затвор с двумя боевыми уступами, достаточно надежный даже для такого мощного патрона, как .
Ложа березовая, покрыта лаком, некрасивая, но удобная, с верхним гребнем, выступом под щеку, пистолетной шейкой с вырезом под ладонь, резиновым затыльником. Если карабин окажется с хорошим боем, эту простую ложу можно было бы заменить на ореховую.
ПРИСТРЕЛКА
Для пристрелки взяли самые обычные патроны Барнаульского завода со стальной гильзой и оболочечной пулей весом 9,1 г, которые встречаются практически во всех охотничьих магазинах. Патроны оказались выпуска 1996 года, хотя приобретены были в московском магазине летом 1999 года. На донышке гильзы нанесена следующая маркировка: «7,62х51М», «96», клеймо завода, «0».
Пристрелку проводили на дистанцию 50 метров в два этапа: сначала с карабином в станке, чтобы оценить совпадение точки прицеливания с точкой попадания, и затем с карабином на мягком упоре, чтобы предварительно определить разброс.
Первый этап. Прошел он более или менее без проблем. Барабанчик прицела поставили на отметку 100 метров, карабин несколько раз заряжали по одному патрону. Стреляли сидя по стандартной мишени на дистанцию 60 метров. Звук выстрела был резкий, «сухой». Все пули уложились в «десятку» и «девятку» мишени чуть выше точки прицеливания, то есть центра мишени. При положении барабанчика прицела на отметке 300 метров пули легли выше точки прицеливания, то есть в полном соответствии с траекторией. Осечек не было, боек хорошо накалывал капсюль, и поэтому решили приступить ко второму этапу. Расчеты проводить не стали, так как пристрелка заранее была оговорена как оценочная. Мнения всех присутствующих совпали: ствол карабина более чем хорош.
Второй этап. Сразу преподнес сюрпризы. Стреляли сидя, положив цевье карабина на мягкий упор — мешок с песком. Магазин зарядили тремя патронами и один в ствол. После первого выстрела стрелок, физически очень сильный человек, поморщился и сказал: «Крепкий патрон», но отстрелял весь магазин, крякая после выстрела.
Карабин зарядили второй раз таким же образом. Последний выстрел сделан, но рукоятка затвора не двигается от обычного усилия руки. Затвор подергали, но безуспешно, и в целях безопасности и сохранности карабина решили аккуратно постучать по рукоятке затвора. Не получилось. Ввели шомпол в ствол и стали осторожно выбивать гильзу, одновременно постукивая по рукоятке затвора.
Наконец затвор открылся, гильза вылетела. На донце ее отчетливо видно, что раздувшийся капсюль полностью заполнил кольцевой паз. Но все пули легли в «десятку» с небольшим разбросом, у всех гильз капсюли хорошо наколоты, поэтому решили продолжить.
Следующую серию патронов отстрелял уже я, сидя и положив карабин на мягкий упор. Карабин зарядил полностью. После первого выстрела почувствовал резкий толчок в плечо. «Не вложился» — решил я и поправил карабин. Но еще два патрона также резко отдавали в плечо. Рукоятку затвора приходилось передергивать с непривычным усилием. Значит, стальные гильзы слегка раздувает в патроннике, и они выдвигаются с большим усилием. После четвертого нажатия на спуск выстрела не было, выждал несколько секунд, как при затяжном выстреле, и передернул затвор. Патрон вылетел, капсюль хорошо наколот, но оставлять такой патрон нельзя.
Я разрядил магазин и заложил осечный патрон в ствол. Пуля легла на границе «десятки» и «девятки». Последний выстрел ничем не отличался от первых трех — все пули легли с небольшим разбросом. Результаты не плохие, однако возникло неприятное ощущение в плече. Но даже один осечный патрон на всю коробочку с двадцатью — слишком много.
Зарядил карабин тремя патронами еще раз. Однако плечо стало ощущаться сильнее, пули легли не так, как хотелось: первая в «десятку», остальные две в «восьмерку» (Мишень 1). После третьего выстрела рукоятка затвора опять не могла двигаться ни под каким усилием. Затвор открыли прежним методом: с шомполом и постукиванием по рукоятке. Мне повезло, что патрон был последний. А если бы это был первый выстрел на охоте!?
Две гильзы из коробочки в двадцать штук заклинило — патроны недопустимы ни на охоте, ни для пристрелки. Заклинивание стальной гильзы в патроннике после выстрела вызвано раздутием ее цилиндрической части и шейки, и может быть объяснено или неточной дозировкой заряда пороха, или его нестабильными характеристиками, или его разложением за четыре года хранения.
Карабин решили больше не мучить, а пристрелку продолжить патронами Новосибирского завода — у него все патроны с латунной гильзой и дозировка пороха точнее. Тем не менее я не исключаю, что барнаульские патроны выпуска 1996 года уже просрочены, а свежие могут оказаться допустимыми. Но я свой выбор сделал, и барнаульскими патронами 7,62х51 со стальной гильзой стрелять из карабина «Лось-7» никогда не стану.
Вывод о надежности и соответствия тактико-технических характеристик этих патронов международным требованиям вы можете сделать сами.
ДЕВЯТИ-МИЛЛИМЕТРОВЫЙ ПАТРОН
Вместе с попыткой пристрелять карабин «Лось-7» была выполнена контрольная проверка карабина «Медведь» под патрон 9,3х53R. Подчеркну, что все патроны имеют только латунную гильзу, а выпущены они в 1985 году. Я стрелял, положив цевье карабина на мягкий упор и прицеливаясь через оптический прицел. Прицел выставлен на 150 метров, поэтому на дистанции 50 м все пули должны были лежать чуть ниже точки прицеливания. Карабин был заряжен тремя патронами, и пули легли как полагается — ниже центра мишени, однако с разбросом (Мишень 2). Но в этом виноват синяк на моем плече, оставленный барнаульскими патронами.
Сейчас иногда делаются попытки поставить на одну доску охотничьи отечественные девятимиллиметровые патроны 9,3х64 и 9,3х53R. На самом деле эти патроны принадлежат разным группам, и их нельзя сравнивать. Одинаковый у них только калибр, а пули разные и скорость полета их различна. И предназначены эти патроны для поражения цели на различных дистанциях. Патроны 9,3х64 развивают очень высокое давление при выстреле. Не надо искать превосходство у патрона 9,3х64 перед 9,3х53R по баллистическим характеристикам, достаточно запомнить, что между ними есть серьезное различие в дистанции поражения цели.
Никто не стреляет патроном 9,3х53R по бегущему лосю на расстоянии 300 метров. Хотя уместно упомянуть кировского охотоведа, который на таком расстоянии положил этим патроном стоящего лося несколькими выстрелами из карабина «Лось» первой модели. Но это исключение лишь подтверждает правило. А патрон 9х64 предназначен именно для таких дистанций. Только не следует забывать, что отдача у него значительная.
СТАЛЬНАЯ ДРОБОВАЯ ГИЛЬЗА
Теперь о стальных гильзах Барнаульского завода для дробовых ружей. Для всех казнозарядных двустволок не годятся стальные гильзы любого завода. Неточность в размерах, особенно вызванная деформацией после выстрела, при открывании и закрывании стволов приводит к увеличению нагрузок на осевой шарнирный болт, рамку запирания, верхний рычаг запирания, ножку и головку экстрактора, а также все трущиеся поверхности. В результате стволы двустволки расшатываются, если вам удается открыть их, осевой болт истирается, а экстрактор может просто сломаться. То же самое можно сказать и о механизме помповых ружей.
Достаточно взять в руки стальные омедненные гильзы 16-го калибра с маркировкой «188», «16», и вспомнишь, сколько хороших ружей этого калибра, особенно легких бельгийских и германских, испорчено преждевременным износом. Эти гильзы оставили нам расшатанные стволы, изуродованные экстракторы и запорные планки.
Что касается самого патронника, то износ его поверхности за счет трения гильзы незначителен, но зато велики усилия, которые при этом возникают и передаются на весь механизм двустволки. Для оружия с газоотводным механизмом перезаряжания, например гладкоствольной «Сайги», влияние стальной гильзы проявляется незначительно, как так вся конструкция такого оружия рассчитана на металлическую гильзу.
Преимущества у стальной гильзы ни перед какой, и тем более пластиковой, на самом деле нет. Пластиковая гильза вообще не заклинивается в любом ружье, и тем более в двустволке, а задержки в стрельбе объясняются только ее разрывом. Но это уже брак гильзы или передозировка заряда пороха. И то и другое недопустимо.
Задать свой вопрос Евгению Копейко можно по электронному адресу: [email protected]
Евгений Копейко 6 июня 2016 в 14:00
Произошла ошибка при установке пользовательского файла cookie
Произошла ошибка при настройке вашего пользовательского файла cookieЭтот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.
Настройка вашего браузера для приема файлов cookie
Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:
- В вашем браузере отключены файлы cookie.Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
- Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, используйте кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
- Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
- Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie.Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
- Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или уточнить у системного администратора.
Почему этому сайту требуются файлы cookie?
Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует от сайта создания нового сеанса для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.
Что сохраняется в файлах cookie?
Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.
Как правило, в файле cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта.Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.
Характеристики последовательностиMR | Загрузить таблицу
Гипоксия играет важную роль в прогнозе и ответе на терапию рака. Таким образом, визуализация гипоксии может быть ценным инструментом для предварительной терапевтической оценки злокачественности опухоли. Однако пока нет стандартной утвержденной методики для клинического применения. Поэтому мы провели исследование у 12 пациентов с глиомой высокой степени злокачественности, в котором напрямую сравнили два наиболее перспективных в настоящее время метода, а именно определение фракции относительной экстракции кислорода на основе МРТ (MR-rOEF) и маркер гипоксии H-1- ( 3- [18F] -фтор-2-гидроксипропил) -2-нитроимидазол ([18F] -FMISO). MR-rOEF определяли из отдельных измерений T2, T2 * и относительного объема церебральной крови (rCBV) с использованием многопараметрического подхода для количественной оценки эффекта, зависимого от уровня оксигенации крови (BOLD).Что касается [18F] -FMISO-PET, помимо обычно используемого позднего поглощения между 120 и 130 мин ([18F] -FMISO120–130 мин), мы также проанализировали специфическую для гипоксии скорость поглощения [18F] -FMISO-k3, так как полученные путем фармакокинетического моделирования данных динамического поглощения. Поскольку фармакокинетическое моделирование частично полученных динамических данных [18F] -FMISO было чувствительным к низкому отношению сигнал / шум, анализ был ограничен областями опухоли с высоким поглощением. Индивидуальный пространственный анализ карт параметров, связанных с деоксигенацией и гипоксией, показал, что высокие значения MR-rOEF группируются в (отечной) перитуморальной ткани, тогда как области с высоким [18F] -FMISO120–130 мин концентрируются внутри и вокруг активной опухоли с нарушенным гематоэнцефалическим барьером , я.е. усиление контраста на Т1-взвешенной МРТ. Корреляции на основе объема интересов между MR-rOEF и [18F] -FMISO120–130 мин, а также [18F] -FMISO-k3 и воксельный анализ у отдельных пациентов дали ограниченные корреляции, подтверждая идею о том, что [ Поглощение 18F] -FMISO, даже через 2 часа, могло все еще зависеть от перфузии, в то время как [18F] -FMISO-k3 сильно затруднялся шумом. Согласно этим результатам, деоксигенация сосудов, измеренная с помощью MR-rOEF, и тяжелая тканевая гипоксия, измеренная с помощью [18F] -FMISO, демонстрируют плохое пространственное соответствие.В целом, эти два метода, по-видимому, скорее предоставляют дополнительную, чем избыточную информацию о биологии глиомы высокой степени злокачественности.
Клиническая характеристика, течение и прогноз рецидивирующего нейромиелита Девича Оптика
Цели:Для оценки клинических характеристик, течения и прогноз оптического нейромиелита Девича (DNO), чтобы оценить прогностическая роль демографических и клинических особенностей, оценить текущие диагностические критерии DNO.
Методы:Демографические, клинические, данные ЦСЖ и МРТ пациентов пострадавшие от DNO были собраны из пятнадцати итальянских центров РС. Критерии включения: 1) два или более острых эпизода неврологическая дисфункция, указывающая на поражение оптики нервного и спинного мозга при одновременном или последующем временном отношение; 2) нет признаков поражения за пределами зрительного нерва или спинной мозг; 3) МРТ головного мозга в начале отрицательная или неспецифический для рассеянного склероза (MS) (поражения белого вещества ≤ 2). Инвалидность оценивалась с помощью расширенной шкалы Курцке. Шкала статуса инвалидности (EDSS).
Результатов:Включено 46 пациентов с рецидивирующим ДНО, 37 женщин и 9 мужчин, средний возраст начала заболевания 40,1 ± 16,3 года (диапазон 12–77 лет). Срок наблюдения — 8,8 ± 3,5 года. среднегодовая частота рецидивов составила 1,3 ± 1,2. После 5, 10 и 15 лет EDSS 3.0 был достигнут соответственно 65%, 82% и 86% случаев, EDSS 6.0 соответственно на 42%, 53% и 69% случаев, EDSS 10 соответственно на 8%, 12% и 23% случаев.Вероятность достижение EDSS 3 статистически коррелировало с возрастом начала заболевания, интервал между первым и 2 -м частота приступов и рецидивов. Вероятность достижения EDSS 6.0 коррелировал с остаточным EDSS в начале и с рецидивом В ходе наблюдения появились очаги поражения белого вещества головного мозга. по 8 предметам. МРТ спинного мозга показала поражения, распространяющиеся на 3 или более сегментов у 39 субъектов, только 1 поражение с участием 1 сегмент у 4 испытуемых и был нормальным у 3 испытуемых. Один или больше Нарушения спинномозговой жидкости были обнаружены как минимум один раз у 29/44 пациентов. (65.9%), чаще всего плеоцитоз (38,6%), олигоклональные полосы (34,1%), высокий уровень белка (25%) и высокий соотношение альбумина (20,5%).
Выводы:DNO в большинстве случаев имеет неблагоприятный прогноз. По сравнению с MS, У пациентов с ДНО возраст дебюта заболевания выше, у женщин — больше. часто поражаются, течение более тяжелое. Головной и спинной мозг МРТ спинного мозга позволяет отличить ДНО от рассеянного склероза. CSF поддерживает вероятность ДНО, если он показывает увеличенные клетки и белки.
Гистологическое распределение и характеристики при МРТ ультрамалого суперпарамагнитного оксида железа в индуцированной этилнитрозомочевиной эндогенной глиоме крысы
Аннотация
Цель: (1) Оценить характеристики усиления ультрамалого суперпарамагнитного контрастного вещества на основе оксида железа (USPIO-CA) по сравнению с контрастным веществом на основе гадолиния (Gd-BCA). (2) Сравнить гистологическое распределение частиц железа, связанных с USPIO (USPIO-IP), с зоной усиления USPIO в ранней сосудистой фазе и в фазе визуализации клеток (E- и L-фаза, соответственно) после внутривенного введения CA.
Методы: Мы провели МРТ с усилением USPIO для эндогенной глиомы крысы, индуцированной N -этил- N -нитрозомочевиной (ENU), включая спин-эхо (SE) T 1 -взвешенные изображения (T 1 WI) и градиентно-вызванное эхо (GRE) T 2 -взвешенных изображений (T 2 WI) до и через 3–6 ч после введения USPIO-CA для изображений E-фазы. Для изображений L-фазы МРТ выполняли через 16–19 и 62–69 ч после введения. Два наблюдателя определили область улучшения USPIO на изображениях E-фазы и области улучшения Gd.Мы сравнили размер расширения USPIO (USPIO-ES) и Gd-ES на сетях SE T 1 WI, и гипоинтенсивный USPIO-ES на GRE T 2 WI и Gd-ES, используя критерий ранжирования со знаком Вилкоксона. . Кроме того, два эксперта визуально оценили соответствие между гистологическим распределением USPIO-IP и областью улучшения USPIO на соответствующих GRE T 2 WI на каждой фазе с использованием 3-балльной шкалы.
Результаты: на изображениях, усиленных USPIO SE T 1 WI, наблюдались значительно меньшие гипер-интенсивные, гипоинтенсивные и комбинированные гипер- / гипоинтенсивные области по сравнению с изображениями, усиленными Gd (все P <0.001). Гипоинтенсивный USPIO-ES на GRE T 2 WI был значительно меньше, чем Gd-ES ( P = 0,001). Распределение USPIO-IP на гистопатологическом образце и усиление USPIO на GRE T 2 WI показало плохое соответствие в 5 из 9 опухолей с улучшением от крыс, умерщвленных рано. Распределение микроглии, содержащей USPIO-IP, соответствовало паттерну усиления USPIO в 2 опухолях с поздним усилением.
Заключение. Характер усиления и размер USPIO-CA в модели глиомы крысы статистически отличались от таковых Gd-BCA.Наши гистологические данные предполагают, что МРТ с усилением USPIO предлагает визуализацию сосудистого русла в E-фазе и может отображать внутриопухолевое распределение иммунных эффекторных клеток в L-фазе.
Исследование влияния комбинации окон на характеристики вентиляции для обеспечения теплового комфорта в зданиях
Девятая Арабская международная конференция по солнечной энергии (AICSE-9), Королевство Бахрейн
Аннотация
Энергоэффективное здание — главная цель строительства исследователи и дизайнеры по всему миру.Очевидно, что любую часть энергии, которую можно сэкономить в этом отношении, можно направить на производственные процессы, если таковые имеются. Энергопотребление в здании можно снизить с помощью различных систем, таких как кондиционирование воздуха (основной потребитель энергии в здании), освещение, оборудование и т. Д. В регионах, где энергия ограничена или дефицитна, кондиционирование воздуха необходимо заменить естественной вентиляцией для удаления тепловая нагрузка здания для теплового комфорта. В этой статье представлены результаты исследования критериев естественной вентиляции под воздействием различных факторов.В частности, учитываются влияние расположения и размера проема (соотношение окна к стене) и ориентации здания относительно преобладающего направления ветра. Визуализация потока и методы конечных элементов были адаптированы для лучшего понимания этих эффектов. Для визуализации потока в Исследовательском центре жилищного строительства и строительства была построена испытательная установка дымовой трубы, которая использовалась для тестирования нескольких идеализированных моделей зданий. С другой стороны, для решения данной проблемы было применено программное обеспечение для расчета жидкости (ANSYS FLOTRAN).Оба метода (визуализация и вычисления) давали четкие картины того, что происходит внутри вентилируемого пространства при различных местах открытия и комбинациях для различных направлений ветра. Зная структуру потока внутри вентилируемого помещения, было бы несложной задачей оценить индекс теплового комфорта (PMV―) для данной тепловой нагрузки (внутреннее отопление, солнечное излучение и т. Д.). Кроме того, такие изображения должны помочь архитекторам предлагать удачные проекты систем естественной вентиляции в своих зданиях.
Ключевые слова
Windows
Вентиляция
Тепловой комфорт
Рекомендуемые статьи Цитирующие статьи (0)
Полный текстАвторские права © 2006 Издано Elsevier BV
Рекомендуемые статьи
Цитирующие статьи
Распространение тензорного тензора головного мозга развитие белого вещества у плодов свиней | BMC Medical Imaging
Морфологические изменения
В группе E69 изменений миелинизации не наблюдалось (рис.2) и были эквивалентны нормальным человеческим уровням гестационного возраста менее 20 недель. В группе E85 низкие точечные сигналы указывали на миелинизацию в мозговом веществе, каудексе головного мозга и на задней части моста на изображениях T2WI без миелинизации в PLIC и латеральных частях таламуса. Это было эквивалентно человеческому уровню при сроке беременности 27–35 недель. В группе E114 в спинном мозге наблюдался слабый сигнал, простирающийся от продолговатого мозга и дорсального моста через медиальный лемниск к ножке головного мозга, вентрально-латеральному таламусу, PLIC и центральной части лучистой короны, что соответствует человеческий уровень новорожденных в гестационном возрасте 40 недель.
Рис.2Карта базальных ганглиев T2WI ( a — c ), FA ( d — f ) (слева и справа гестационный возраст 69, 85, 114 дней соответственно) Нет миелинизации изменения наблюдались в группе E69 ( a ). В группе E85 низкие точечные сигналы указывали на миелинизацию в мозговом веществе, каудексе головного мозга и на задней части моста на изображениях T2WI, без миелинизации в PLIC и латеральных частях таламуса ( b ). В группе E114 высокий сигнал наблюдался в спинном мозге, простирающемся от продолговатого мозга и дорсального моста через медиальный лемниск к ножке головного мозга, латеральной вентральной таламусе, PLIC и центральной части лучевой коронки ( c )
В зародышевом матриксе (рис.3) у группы E69 был низкий сигнал в зародышевом матриксе вдоль переднего рога, таламической хвостовой борозды и заднего рога. Группа E85 имела низкий сигнал, соответствующий переднему рогу и таламической бороздке хвоста, но не заднему рогу, что было эквивалентно человеческому уровню на 26 неделе гестационного возраста. В группе E114 не наблюдалось зародышевого матрикса, что соответствовало человеческому уровню в возрасте старше 34 недель.
Рис. 3Карта T2WI зародышевой матрицы ( a — c ) (слева и справа — гестационный возраст 69, 85, 114 дней соответственно) в группе E69 был низкий сигнал в зародышевой матрице вдоль передний рог, таламическая хвостовая борозда и задний рог ( a ).Группа E85 имела низкий сигнал, соответствующий переднему рогу и таламической бороздке хвоста, но не заднему рогу ( b ). В группе E114 зародышевого матрикса не наблюдалось ( c )
Борозды и извилины (рис. 4) в группе E69 показали гладкую островок без передней или задней височной борозды, видимую борозду мозга в полушарии и боковую церебральную трещину, разделяющую лобно-височную и теменную затылочную борозды. В группе E85 наблюдались неглубокие островковые борозда и извилина с неглубокими передней и задней височными бороздами.Наблюдались Fissura calcarina, sulcus ambis, передняя центральная извилина, центральная извилина и задняя извилина, а также неглубокие передняя и задняя лобные извилины, а также передняя и задняя височная извилина. В группе E114 наблюдались глубокая островковая борозда и извилина, а также углубленные передняя и задняя височные борозды, а также глубокая передняя и задняя лобная извилина, передняя и задняя височная извилина и височная затылочная извилина, а также видимая лобно-височная извилина.Боковая щель мозга почти закрыта, островок покрыт.
Рис.4T2WI-карта развития церебральной борозды ( a — c ) (слева и справа — гестационный возраст 69, 85, 114 дней соответственно) В группе E69 гладкая островковая часть без переднего или заднего височная борозда, видимая полусферная церебральная борозда и боковая церебральная трещина, разделяющая лобно-височную и теменную затылочную борозды ( a ). В группе E85 наблюдались неглубокие островковые борозда и извилина с неглубокими передней и задней височными бороздами.Наблюдались Fissura calcarina, sulcus ambis, передняя центральная извилина, центральная извилина и задняя извилина, а также неглубокие передняя и задняя лобные извилины, а также передняя и задняя височные извилины ( b ). В группе E114 наблюдались глубокая островковая борозда и извилина, а также углубленные передняя и задняя височные борозды, а также глубокая передняя и задняя лобная извилина, передняя и задняя височная извилина и височная затылочная извилина, а также видимая лобно-височная извилина.Боковая щель головного мозга практически закрыта, островок покрыт ( c )
Показатели зрелости мозга в группе E69, группе E85 и группе E114 составляли 1, 6 и 11 баллов соответственно и были приблизительно эквивалентны уровням плода человека на 20, 27 и 40 неделях. соответственно [16].
Данные DTI
Не было обнаружено значительных различий в значениях FA между левым и правым полушариями головного мозга в одном и том же месте с использованием парных t-критериев ( P > 0.05). Средние значения были рассчитаны для дальнейшего анализа.
Средние значения FA глубокого белого вещества головного мозга в различных гестационных возрастных группах, включая ALIC, PLIC, GCC, SCC, PV, OR и CR, и в поверхностном мозговом WM, включая лобную долю, теменную долю, височную долю и затылочная доля (таблица 1). Значения FA в разных частях мозга на одном и том же сроке беременности были разными. Для группы E114 областями с наибольшим и наименьшим значениями FA были PLIC, ALIC, SCC, GCC, PV, OR, CR, затылочная, теменная, височная и лобная доли WM.Для группы E85 значения FA были (от самого высокого до самого низкого): PLIC, SCC, PV, OR, ALIC, GCC, CR, затылочная, теменная, лобная и височная доли WM. Для E69 значения FA были (от самого высокого до самого низкого): PLIC, PV, SCC, GCC, ALIC, CR, лобная, теменная, височная и затылочная доли WM. В процессе общего развития среди глубоких церебральных WM значения FA PLIC и SCC были выше, а значения OR и CR были ниже.
Таблица 1 Среднее значение FA на разных участках разного срока беременности Анализ ранговой корреляцииСпирмена показал, что значение FA каждой области интереса положительно коррелировало с гестационным возрастом, и корреляция была статистически значимой ( P <0.01) (таблица 2).
Таблица 2 Анализ корреляции между значением FA и гестационным возрастом на разных участкахОднофакторный анализ ANOVA различий между значениями FA в различных регионах на разных сроках беременности не показал статистически значимых различий в глубоких церебральных WM между группой E69 и группой E85, за исключением ALIC и SCC ( P > 0,05). . Достоверных различий между WM лобной и височной долей не было ( P > 0.05). Средние значения FA глубокого церебрального WM были выше, чем периферического церебрального WM ( P <0,05) (таблица 3).
Таблица 3 Таблица данных WM глубокого и поверхностного мозга Анализ ранговой корреляцииСпирмена показал, что значение FA каждой области интереса положительно коррелировало с гестационным возрастом, и корреляция была статистически значимой ( P <0,01) (таблица 3). Значения FA анатомических областей постепенно увеличивались с возрастом беременности, но с разной скоростью.Возрастание изменений на первом этапе, от второго триместра до поздних сроков беременности, было медленным (глубокое и периферическое увеличение церебральной WM составило 1,36% и 23,92% соответственно). Увеличение на втором этапе, от позднего срока беременности до неонатального периода, было большим (увеличение глубокого и периферического церебрального WM составило 76,2% и 83,2% соответственно).
Однофакторный ANOVA-анализ различий в значениях FA для разных частей или разных сроков беременности не показал значимых различий в глубокой церебральной WM, за исключением группы E69 и группы E85 ( P > 0.05).
Гистологическое исследование ткани головного мозга плода свиньи
Окрашивание НЕ белого вещества головного мозга
Окрашивание НЕ и изображения головного мозга плода свиньи на разных сроках беременности (рис. 5) с помощью оптической микроскопии показали, что поверхностные нейроны WM в E69 группа была незрелой с редкими нервными волокнами и отростками. Глубокий WM показал розовое окрашивание цитоплазмы с более зрелыми нейронами и редкими нервными волокнами.
Рис.5200-кратное окрашивание HE с помощью светового микроскопа (слева направо, лобная доля, передние части) ( a , b : группа E69; группа c и d : E85; e , ф : группа E114) T
Нервные волокна группы E85 не были плотно сгруппированы, плотность нервных волокон существенно не отличалась от плотности нервных волокон группы E69, но в них было значительно увеличено количество нейронов.По сравнению с группой E69 нейроны в глубоком мозговом WM группы E85 были более плотно сгруппированы, зрелы и близки к нормальному состоянию, с большим количеством и плотностью глиальных клеток, более концентрированными нейронными волокнами и увеличенным количеством и длиной клеточные отростки (аксоны или дендриты).
Морфология и количество поверхностных нейронов WM в группе E114 были близки к таковым в группе E85, но с более плотными нервными волокнами. Морфология глубоких WM нейронов головного мозга в группе E114 существенно не изменилась по сравнению с предыдущей стадией, но нервные волокна были толще, а глиальные клетки стали крупнее и сложнее, что соответствовало началу миелинизации.
Окрашивание LFB белого вещества головного мозга
Окрашивание головного мозга свиньи LFB на разных сроках беременности (рис. 6) показало ярко-синее окрашивание миелиновой оболочки, видимое под оптической микроскопией. Типичное фуникулярное распределение окрашивания в синий цвет наблюдалось в глубоких церебральных тканях головного мозга в группе E114. Не наблюдалось окрашивания в синий цвет ни в глубоком, ни в поверхностном мозговом теле из групп E69 и E85, так и в поверхностном мозговом теле из группы E114.
Рис.6Окрашивание FLB в 200 раз с помощью светового микроскопа (внутреннее белое вещество головного мозга: a : группа E69, b : группа E85, c : группа E114)
Число нейронов поверхностной ВМ в группе E69, группе E85, группе E114 было 6.38 ± 3,045,13,73 ± 7,029,16,13 ± 9,993 соответственно. Количество глиальных клеток поверхностной ВМ в группе E69, группе E85, группе E114 составило 11,69 ± 3,505,61,98 ± 23,460,64,50 ± 26,203 соответственно. Количество нейронов глубокой ВМ в группе E69, группе E85, группе E114 составило 9,95 ± 4,952,18,81 ± 9,022,18,79 ± 8,446 соответственно. Количество глиальных клеток глубокого WM в группе E69, группе E85, группе E114 составило 13,50 ± 4,596,121,00 ± 40,811,116,84 ± 44,584 соответственно.
Средние значения нескольких групп сравнивались с помощью однофакторного дисперсионного анализа, а сравнение между группами выполнялось методом SNK.На основании α = 0,05 не было статистически значимой разницы в среднем популяции нейронов и глиальных клеток между группой E85 и группой E114, включая WM глубокого мозга и WM поверхностного мозга. Кроме того, между любыми другими двумя группами существует значительная статистическая разница в среднем населении.
MsrR способствует характеристикам клеточной поверхности и вирулентности в Staphylococcus aureus | Письма о микробиологии FEMS
Аннотация
MsrR, фактор, способствующий устойчивости к метициллину у Staphylococcus aureus , принадлежит к семейству LytR-CpsA-Psr белков, связанных с клеточной оболочкой.Удаление msrR увеличивало размер и агрегацию клеток, а также изменяло свойства оболочки, что приводило к временному снижению гидрофобности клеточной поверхности, уменьшению способности к распространению колоний и повышенной восприимчивости к конго красному. Пониженное содержание фосфора в очищенных клеточных стенках мутанта msrR свидетельствует о снижении содержания тейхоевых кислот в стенках, что может объяснить некоторые из наблюдаемых фенотипов. Анализ микроматрицы мутанта с делецией msrR выявил только незначительные изменения в глобальном транскриптоме, предполагая, что MsrR выполняет структурные, а не регуляторные функции.Важно отметить, что вирулентность мутанта msrR была снижена в анализе уничтожения нематод, а также при экспериментальном эндокардите у крыс. Следовательно, MsrR, вероятно, играет роль в поддержании клеточной оболочки, разделении клеток и патогенности S. aureus .
Введение
Staphylococcus aureus обладает способностью быстро адаптироваться к изменяющимся условиям окружающей среды и обладает солидным арсеналом факторов вирулентности.Сложная регуляторная сеть контролирует скоординированную экспрессию ассоциированных с поверхностью и экзопротеидов, которые важны для колонизации и вирулентности хозяина (Bronner et al. , 2004; Cheung et al. , 2004). При воздействии ингибирующих концентраций антибиотиков, повреждающих клеточную стенку, S. aureus отвечает усилением стимулятора стресса клеточной стенки (Utaida et al. , 2003; McCallum et al. , 2006). Стимул стресса клеточной стенки включает гены, отнесенные к различным функциональным категориям, включая ряд генов, участвующих в метаболизме клеточной стенки.Различные члены стимулятора стресса клеточной стенки были связаны с устойчивостью к метициллину или промежуточной устойчивостью к ванкомицину у S. aureus (Utaida et al. , 2003; McAleese et al. , 2006). Одним из этих генов является msrR (регулятор метионинсульфоксидредуктазы), который способствует развитию высокого уровня устойчивости к β-лактамным антибиотикам (Rossi et al. , 2003). MsrR принадлежит к группе мембранных белков, разделяющих предсказанный внеклеточный LytR-CpsA-Psr домен с неизвестной функцией.Это семейство белков в основном встречается у грамположительных бактерий (Hübscher et al. , 2008). К настоящему времени описано несколько членов семейства белков LytR-CpsA-Psr: LytR Bacillus subtilis является аттенюатором транскрипции самого себя и дивергентно транскрибируемого оперона lytABC , который кодирует липопротеин (LytA), N -ацетилмурамоил-1-аланинамидаза (LytC) и LytB, белок-модификатор LytC (Lazarevic et al. , 1992). Стрептококковый белок CpsA является активатором транскрипции экспрессии гена капсулы (Cieslewicz et al., 2001). BrpA (белок А, регулирующий биопленку), гомолог LytR в Streptococcus mutans , участвует в автолизе, формировании биопленок и вирулентности (Nakano et al. , 2005; Wen et al. , 2006). Первоначально предполагалось, что Psr является репрессором синтеза пенициллин-связывающего белка 5 (PBP5) в Enterococcus hirae , но ни его роль в подавлении синтеза PBP5, ни в регуляции автолиза или устойчивости к β-лактамным антибиотикам не могла быть подтверждена (Sapunaric et al., 2003). Эксперименты с нематодой Caenorhabditis elegans показали, что как Psr из Enterococcus faecalis , так и MsrR из S. aureus играют роль в вирулентности (Bae et al. , 2004; Maadani et al. , 2007). Предполагается, что белки семейства LytR-CpsA-Psr функционируют в поддержании клеточной оболочки, хотя их функциональная роль до сих пор не выяснена.
В этом исследовании мы демонстрируем, что белок MsrR семейства S. aureus LytR-CpsA-Psr влияет на клеточную поверхность и свойства оболочки и способствует вирулентности как у нематод, так и на модели инфекции эндокардита крыс.
Материалы и методы
Штаммы бактерий и условия роста
Штаммы и плазмиды, использованные в этом исследовании, перечислены в таблице 1. Культуры выращивали в бульоне мозг-сердце (BHI) (Difco) при встряхивании со скоростью 180 об / мин. и 37 ° C, если не указано иное. При необходимости добавляли ампициллин 100 мкг мл -1 , тетрациклин 10 мкг мл -1 , эритромицин 10 мкг мл -1 или хлорамфеникол 5-10 мкг мл -1 .
1Штаммы и плазмиды, использованные в этом исследовании
Штаммы или плазмиды | Соответствующий генотип и фенотип | Ссылки или источники | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Штаммы | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
9036 DH 366 E. | F-φ80 lac ZΔM15 Δ ( lac ZYA- arg F) U169 rec A1 конец A1 hsd R17 (r k -, m k +) pho sup E44 thi -1 gyr A96 rel A1λ− | Invitrogen | S.aureus | RN4220 | NCTC8325-4, rsbU — r- m +; Mc s | Kreiswirth et al. (1983) | BB270 | NCTC8325 производное, тип I SCC mec rsbU — Δ30 kb SmaI-F; Mc r | Berger-Bächi (1983) | MSSA1112 | Клинический изолят, bla ; Mc s | Entenza et al. (1997) | J156 | MSSA1112, Δ msrR ( 171-984) :: ermB ; Mc s Em r | Rossi et al. (2003) | Jh200 | MSSA1112, Δ msrR :: ermB ; Mc s Em r | Это исследование | Jh200 pGC2 msrR | MSSA1112, Δ msrR :: ermB ; pGC2 msrR ; Mc s Em r Cm r | Это исследование | COLn | COL, вылечено от pT181, SCCmec типа I, Mc r | Katayama et al. (2004) | JH99 | COLn, Δ msrR :: ermB ; Mc r Em r | Данное исследование | JH99 pGC2 msrR | COLn, Δ msrR :: ermB ; pGC2 msrR ; Mc r Em r Cm r | Это исследование | Плазмиды | pEC1 | Плазмида E. coli , ori ColE1 268 bla ermB; Am r , Em r | Bruckner (1997) | pBT | E.плазмида coli , ori ColE1 tetL ; TC r | Giachino et al. (2001) | pJH011 | pBT с фрагментом размером 3,3 т.п.н., содержащим ermB , фланкированным последовательностью msrR вверх и вниз по течению; Tc r | Это исследование | pGC2 | челночная плазмида E. coli — S. aureus , ori ColE1- ori pC194 bla cat; Э.coli Am r S. aureus Cm r | Skinner et al. (1988) | pGC2 msrR | pGC2, содержащая фрагмент размером 1,3 т.п.н., охватывающий msrR; E. coli Am r ; S. aureus Cm r | Это исследование | |
Штаммы или плазмиды | Соответствующий генотип и фенотип | Ссылки или источники | 90ins3coli |
DH5α | F-φ80 lac ZΔM15 Δ ( lac ZYA- arg F) U169 rec A1 конец A1 hsd — r ksd k k +) pho A sup E44 thi -1 gyr A96 rel A1λ− | Invitrogen |
S. aureus | ||
Kreiswirth et al. (1983) | ||
BB270 | NCTC8325 производное, тип I SCC mec rsbU — Δ30 kb SmaI-F; Mc r | Berger-Bächi (1983) |
MSSA1112 | Клинический изолят, bla ; Mc s | Entenza et al. (1997) |
J156 | MSSA1112, Δ msrR ( 171-984) :: ermB ; Mc s Em r | Rossi et al. (2003) |
Jh200 | MSSA1112, Δ msrR :: ermB ; Mc s Em r | Это исследование |
Jh200 pGC2 msrR | MSSA1112, Δ msrR :: ermB ; pGC2 msrR ; Mc s Em r Cm r | Это исследование |
COLn | COL, вылечено от pT181, SCCmec типа I, Mc r | Katayama et al. (2004) |
JH99 | COLn, Δ msrR :: ermB ; Mc r Em r | Данное исследование |
JH99 pGC2 msrR | COLn, Δ msrR :: ermB ; pGC2 msrR ; Mc r Em r Cm r | Это исследование |
Плазмиды | ||
pEC1 | Плазмида E. coli , ori ColE1 268 bla ermB; Am r , Em r | Bruckner (1997) |
pBT | E.плазмида coli , ori ColE1 tetL ; TC r | Giachino et al. (2001) |
pJH011 | pBT с фрагментом размером 3,3 т.п.н., содержащим ermB , фланкированным последовательностью msrR , расположенной вверх и вниз по течению; Tc r | Это исследование |
pGC2 | челночная плазмида E. coli — S. aureus , ori ColE1- ori pC194 bla cat; Э.coli Am r S. aureus Cm r | Skinner et al. (1988) |
pGC2 msrR | pGC2, содержащая фрагмент размером 1,3 т.п.н., охватывающий msrR; E. coli Am r ; S. aureus Cm r | Это исследование |
Штаммы и плазмиды, использованные в этом исследовании
Штаммы или плазмиды | Соответствующий генотип и фенотип | Штаммы |
E.coli | ||
DH5α | F-φ80 lac ZΔM15 Δ ( lac ZYA- arg F) U169 rec A1 конец A1 hsd — r ksd k k +) pho A sup E44 thi -1 gyr A96 rel A1λ− | Invitrogen |
S. aureus | ||
Kreiswirth et al. (1983) | ||
BB270 | NCTC8325 производное, тип I SCC mec rsbU — Δ30 kb SmaI-F; Mc r | Berger-Bächi (1983) |
MSSA1112 | Клинический изолят, bla ; Mc s | Entenza et al. (1997) |
J156 | MSSA1112, Δ msrR ( 171-984) :: ermB ; Mc s Em r | Rossi et al. (2003) |
Jh200 | MSSA1112, Δ msrR :: ermB ; Mc s Em r | Это исследование |
Jh200 pGC2 msrR | MSSA1112, Δ msrR :: ermB ; pGC2 msrR ; Mc s Em r Cm r | Это исследование |
COLn | COL, вылечено от pT181, SCCmec типа I, Mc r | Katayama et al. (2004) |
JH99 | COLn, Δ msrR :: ermB ; Mc r Em r | Данное исследование |
JH99 pGC2 msrR | COLn, Δ msrR :: ermB ; pGC2 msrR ; Mc r Em r Cm r | Это исследование |
Плазмиды | ||
pEC1 | Плазмида E. coli , ori ColE1 268 bla ermB; Am r , Em r | Bruckner (1997) |
pBT | E.плазмида coli , ori ColE1 tetL ; TC r | Giachino et al. (2001) |
pJH011 | pBT с фрагментом размером 3,3 т.п.н., содержащим ermB , фланкированным последовательностью msrR вверх и вниз по течению; Tc r | Это исследование |
pGC2 | челночная плазмида E. coli — S. aureus , ori ColE1- ori pC194 bla cat; Э.coli Am r S. aureus Cm r | Skinner et al. (1988) |
pGC2 msrR | pGC2, содержащая фрагмент размером 1,3 т.п.н., охватывающий msrR; E. coli Am r ; S. aureus Cm r | Это исследование |
Штаммы или плазмиды | Соответствующий генотип и фенотип | Ссылки или источники | 90ins3coli |
DH5α | F-φ80 lac ZΔM15 Δ ( lac ZYA- arg F) U169 rec A1 конец A1 hsd — r ksd k k +) pho A sup E44 thi -1 gyr A96 rel A1λ− | Invitrogen |
S. aureus | ||
Kreiswirth et al. (1983) | ||
BB270 | NCTC8325 производное, тип I SCC mec rsbU — Δ30 kb SmaI-F; Mc r | Berger-Bächi (1983) |
MSSA1112 | Клинический изолят, bla ; Mc s | Entenza et al. (1997) |
J156 | MSSA1112, Δ msrR ( 171-984) :: ermB ; Mc s Em r | Rossi et al. (2003) |
Jh200 | MSSA1112, Δ msrR :: ermB ; Mc s Em r | Это исследование |
Jh200 pGC2 msrR | MSSA1112, Δ msrR :: ermB ; pGC2 msrR ; Mc s Em r Cm r | Это исследование |
COLn | COL, вылечено от pT181, SCCmec типа I, Mc r | Katayama et al. (2004) |
JH99 | COLn, Δ msrR :: ermB ; Mc r Em r | Данное исследование |
JH99 pGC2 msrR | COLn, Δ msrR :: ermB ; pGC2 msrR ; Mc r Em r Cm r | Это исследование |
Плазмиды | ||
pEC1 | Плазмида E. coli , ori ColE1 268 bla ermB; Am r , Em r | Bruckner (1997) |
pBT | E.плазмида coli , ori ColE1 tetL ; TC r | Giachino et al. (2001) |
pJH011 | pBT с фрагментом размером 3,3 т.п.н., содержащим ermB , фланкированным последовательностью msrR вверх и вниз по течению; Tc r | Это исследование |
pGC2 | челночная плазмида E. coli — S. aureus , ori ColE1- ori pC194 bla cat; Э.coli Am r S. aureus Cm r | Skinner et al. (1988) |
pGC2 msrR | pGC2, содержащая фрагмент размером 1,3 т.п.н., охватывающий msrR; E. coli Am r ; S. aureus Cm r | Данное исследование |
Аллельная замена
msrRФрагменты покрытия c . Области размером 0,9 т.п.н. ниже и выше msrR были амплифицированы из штамма BB270 с праймерами msrR _do_PstI (5′-CCGCTGCAGGATTAAAAATAAACAAGGCG-3 ‘), msrR _do_CGAT_HindIII (5′-CCGAGAGE _do_TAC_HindIII) (5′-CCGAGA (5′-CCTGAATTCAGTAATGCGTGTAATACGTC-3 ‘), msrR _up_BamHI (5′-CGTGGATCCTTTACCTACCTTATCTTC-3′), соответственно, и лигировали в 3 ‘и 5’, соответственно, ermB .Полученную вставку клонировали в суицидную плазмиду pBT S. aureus с получением pJH011. pJH011 электропорировали в штамм RN4220, и устойчивые к эритромицину трансформанты проверяли на потерю устойчивости к тетрациклину. Полученная в результате делеция Δ msrR :: ermB была трансдуцирована в штамм MSSA1112 S. aureus с помощью фага 80α (Berger-Bächi, 1983).
Конструирование плазмиды комплементации
фрагмент А, содержащий msrR , в том числе его собственный промотор и терминатор областей, амплифицировали из штамма BB270 с использованием праймеров msrR _f_BamHI (5′-GGAGGATCCTTAATTAGTTACATCCTTTCATTAGACCTTAG-3 ‘) и msrR _r_BamHI (5′-GGAGGATCCGCAATTCACGTTGTTATAGAAG-3′) , и был клонирован в Escherichia coli — S.aureus челночный вектор pGC2. Полученную плазмиду pGC2 msrR электропорировали в RN4220, откуда ее трансдуцировали в представляющие интерес штаммы.
Нозерн-блот анализ
Клетки собирали из культур, выращенных в бульоне Лурия-Бертани (LB), и экстрагировали РНК согласно Cheung et al. (1992). Восемь микрограммов общей РНК использовали для Нозерн-гибридизации и зондировали ДНК-зондами, меченными дигоксигенином, как описано Rossi et al. (2003).
Анализ микрочипов
Ночные культуры разводили в 100 раз свежей предварительно нагретой средой LB (Difco) и выращивали до OD 600 нм 0,6. Затем клетки смешивали (1: 2) с бактериальным реагентом RNAprotect (Qiagen), как указано производителем. РНК выделяли, как описано Cheung et al. (1992) и очищали с использованием набора RNeasy с расщеплением ДНКseI на колонке (Qiagen). Целостность РНК проверяли на Agilent 2100 BioAnalyser.кДНК синтезировали с использованием обратной транскриптазы SuperScript II и случайных гексамерных праймеров (Invitrogen) и метили Cy3- или Cy5-dCTP (GE Healthcare). Микроматрица продукта ПЦР S. aureus и протоколы гибридизации описаны в Witney et al. (2005). Слайды сканировали с помощью сканера Affymetrix 428, и данные извлекали с помощью bluefuse 3.0 (BlueGnome, Cambridge). Три биологические копии как дикого типа, так и мутанта были гибридизированы друг с другом в экспериментах с заменой красителя, и данные всех шести массивов были нормализованы и проанализированы с использованием genespring 7.2 (Silicon Genetics). Список дифференциально экспрессируемых генов включает гены с двукратным или большим изменением уровня экспрессии и t -тестовые значения P ≤0,05 (вспомогательная информация, таблица S1).
Тесты на чувствительность к оксациллину
Минимальные ингибирующие концентрации (МИК) оксациллина определяли с использованием тест-полосок Etest (AB Biodisk, Solna, Швеция). Качественные различия в уровнях устойчивости оценивали с помощью мазка 0,5 стандартных клеточных суспензий МакФарланда вдоль градиента антибиотика на прямоугольных чашках с агаром LB.Градиентные планшеты инкубировали при 35 ° C в течение 24 часов.
Просвечивающая электронная микроскопия (ПЭМ)
Клетки, выросшие до OD 600 нм 0,7 или в течение ночи, что соответствует экспоненциальной или стационарной фазе роста, соответственно, фиксировали 2,5% глутаральдегидом в фосфатно-солевом буфере при pH 7,2 в течение 1 часа. Электронная микроскопия была проведена в Центре микроскопии и анализа изображений Цюрихского университета.
Адгезия к полистиролу
Адгезию к полистирольным пластинам с использованием BHI с добавлением 1% (мас. / Об.) Глюкозы в качестве культуральной среды измеряли, как описано ранее (Seidl et al., 2008). Чтобы проверить, зависит ли образование биопленок от продукции полисахаридного межклеточного адгезина (PIA), белков или ДНК, в культуры добавляли 10 мМ метапериодата натрия (NaIO 4 ), 100 мкг / мл -1 протеиназы K или 100 мкг / мл −1 ДНКseI соответственно.
Конго красные пробы
Фенотип ростаКонго красного тестировали путем внесения аликвот 10 7 бактерий в мл -1 , суспендированных в 0,9% NaCl, на чашки с агаром BHI с добавлением 0.08% (мас. / Об.) Конго красного и 1% (мас. / Об.) Глюкозы с использованием автоматического инокулятора Microtiter AB80 (Dynatech, Дюбендорф, Швейцария). Для определения МИК в агар вводили двукратные разведения Конго красного (начиная с 32 г л -1 ). Чашки с красным агаром Конго инкубировали при 37 ° C в течение 24 часов, а затем при комнатной температуре в течение дополнительных 24 часов. Связывание с конго красным оценивали в 1 мл бактерий, выращенных в течение 4 ч при 37 ° C, и концентрировали до OD 600 нм , равного 7. Клетки собирали, промывали один раз 10 мМ натрий-фосфатным буфером, pH 6.8, 85 мМ NaCl, а затем ресуспендировали в 1 мл 0,2 мМ Конго красного, разведенного в том же буфере, и инкубировали в течение 30 мин при комнатной температуре при осторожном перемешивании. Клетки собирали и измеряли OD 480 нм супернатанта для определения количества несвязанного Конго красного.
Распространение колоний
Способность к распространению колонийоценивали, как описано Kaito & Sekimizu (2007), используя чашки с мягким агаром BHI, содержащие 0,24% (мас. / Об.) Агара и 1% (мас. / Об.) Глюкозы.Два микролитра ночных культур наносили на чашки и отслеживали распространение по поверхности через 10 ч инкубации.
Определение относительной гидрофобности клеточной поверхности
Ночные культуры разводили в 200 раз в бульоне BHI и выращивали при 37 ° C. Клетки собирали центрифугированием при 5000 g в течение 5 минут, дважды промывали 0,15 M NaCl, доводили OD 600 нм до 0,95–1,25 в 0,15 M NaCl и подвергали модифицированной микробной адгезии к углеводородам ( MATH) (Rosenberg et al., 1980). Вкратце, 40 мкл гексадекана смешивали с 0,8 мл клеточной суспензии в 2-мл полипропиленовой пробирке Эппендорфа и дважды встряхивали в течение 30 с. Фазам давали возможность разделиться в течение 15 минут перед удалением водной фазы для измерения OD 600 нм . Процент сродства к гексадекану рассчитывали по формуле:% сродства = 100 × [1- (OD после смешивания / OD перед смешиванием)]. Эксперименты проводили в трех экземплярах.
Получение и количественное определение тейхоевых кислот стенки (WTA)
Стенки клеток и WTA получали, как описано ранее (Majcherczyk et al., 2003). Количество WTA опосредованно количественно определяли путем определения содержания фосфора в клеточной стенке, как описано в Ames & Dubin (1960). Эксперименты проводились трижды с тремя повторностями на образец.
Анализ уничтожения нематод
Заражение штаммом Bristol N2 C. elegans проводили, как описано ранее (Sifri et al. , 2003). Выживаемость рассчитывалась с использованием метода Каплана-Мейера, а различия в выживаемости проверялись на значимость с использованием логарифмического рангового теста (призма графической панели, версия 4.0).
Эндокардит крысы модель
Катетер-индуцированное разрастание аорты было продуцировано у крыс, как описано ранее (Heraief et al. , 1982). Группы крыс инокулировали 10 4 КОЕ из культур в фазе экспоненциального роста. Это минимальный инокулят, вызывающий эндокардит у> 90% животных [90% инфекционная доза (ID 90 )], зараженных штаммом дикого типа, что позволило дифференцироваться с предполагаемыми менее вирулентными штаммами.Крыс умерщвляли через 16 часов после инокуляции и определяли бактериальные титры, выраженные как среднее значение log 10 КОЕ на -1 ткани в вегетации, селезенке и культурах крови. Статистические различия, сравнивающие уровни инфицирования, оценивались с использованием критерия χ 2 с поправкой Йетса.
Результаты
Аллельная замена
msrRИсходный мутант msrR J156 все еще содержал N-концевой и трансмембранный сегменты (Rossi et al., 2003). Чтобы исключить возможность того, что предыдущие наблюдения были искажены остатками MsrR, полная ORF msrR была удалена путем аллельной замены в изоляте клинического эндокардита, MSSA1112, давая штамм Jh200. Как и в случае усеченного мутанта J156, чувствительность к β-лактаму у нового мутанта Jh200 несколько увеличилась. Устойчивость восстанавливалась до исходных значений путем введения msrR дикого типа в trans на плазмиде pGC2 msrR (фиг.1). Полная делеция MsrR в устойчивом к метициллину штамме COLn имела такой же эффект на устойчивость к оксациллину, как и усечение MsrR, описанное Rossi et al. (2003) (рис.1). Не наблюдалось никаких эффектов на скорость роста или спонтанный и индуцированный Triton X-100 автолиз, как в случае усеченного мутанта (данные не показаны), что позволяет предположить, что оба мутанта были идентичны в этом отношении.
1
Влияние делеции всего ORF msrR на чувствительность к оксациллину на фоне чувствительности к метициллину (MSSA1112) и устойчивости к метициллину (COLn).Штаммы дикого типа, их соответствующие мутанты msrR Jh200 и JH99, а также мутанты, несущие либо пустую плазмиду (pGC2), либо плазмиду комплементации msrR (pGC2 msrR ), мазали мазками в соответствии с градиентами антибиотика, как указано. Показаны соответствующие значения MIC (мкг / мл -1 ).
1
Влияние делеции всей ORF msrR на чувствительность к оксациллину в метициллин-чувствительном (MSSA1112) и метициллин-устойчивом (COLn) фоне.Штаммы дикого типа, их соответствующие мутанты msrR Jh200 и JH99, а также мутанты, несущие либо пустую плазмиду (pGC2), либо плазмиду комплементации msrR (pGC2 msrR ), мазали мазками в соответствии с градиентами антибиотика, как указано. Показаны соответствующие значения MIC (мкг / мл -1 ).
Анализ микрочипов
Ранее сообщалось, что инактивация msrR приводит к преждевременной транскрипции sarA (Rossi et al., 2003). Если бы MsrR действовал как регулятор sarA , который контролирует экспрессию экзопротеинов и факторов вирулентности (Cheung et al. , 1992; Chien et al. , 1999), изменения в транскриптоме всего генома были бы быть ожидаемым. Однако дифференциальные микроматрицы из экспоненциально растущих клеток в момент наивысшей экспрессии msrR (Rossi et al. , 2003) неожиданно выявили очень мало и только очень небольшие изменения транскрипции.Тринадцать генов были усилены, а 18 генов подавлены в Jh200 по сравнению с MSSA1112 (Таблица S1). Среди этих генов были представители путей биосинтеза пуринов и пиримидинов, которые, по-видимому, регулируются в различных условиях (Dunman et al. , 2001; Resch et al. , 2005; Fox et al. , 2007; Sobral et al., , 2007), и, следовательно, вероятно, не отражают специфический эффект msrR . Более того, различия в уровнях экспрессии были очень низкими (в среднем 2.3). Единственным геном с более чем четырехкратным увеличением был SA1196 (гипотетический белок, подобный белку восстановления повреждений ДНК), картирующий ниже msrR . Это усиление регуляции было очень вероятно из-за полярного эффекта аллельной замены. В выбранных условиях анализ микроматрицы не выявил каких-либо изменений транскрипции в известных факторах вирулентности или глобальных регуляторах после делеции msrR . Влияние MsrR на транскрипцию sarA , первоначально описанное Rossi et al. оказался зависимым от штамма и культуры. Повторные сравнения между диким типом и обоими мутантами msr R в основном не показали различий в транскрипции sarA , как показано на рис. 2.
2
Нозерн-блоты транскриптов sarA дикого типа MSSA1112, усеченного мутанта msrR J156, полного мутанта с делецией msrR Jh200 и дополненного мутанта msrR Jh200 pGrC2 msrC2 .OD 600 нм моменты времени сбора клеток приведены над графиком.
2
Нозерн-блоты транскриптов sarA дикого типа MSSA1112, усеченный мутант msrR J156, полный мутант с делецией msrR Jh200 и комплементарный msrR мутант pGC2 Jh200. OD 600 нм моменты времени сбора клеток приведены над графиком.
Морфология клеток
Делеция msrR оказала сильное влияние на морфологию клеток, как проиллюстрировано с помощью ПЭМ (рис.3). Мутант Jh200 содержал субпопуляцию резко увеличенных клеток. В фазе экспоненциального роста средний продольный диаметр Jh200 составлял 1,30 ± 0,16 мкм по сравнению с 1,11 ± 0,12 мкм у MSSA1112, что соответствует среднему увеличению на 16,9% ( P <0,001, t -тест). Различия в диаметрах перегородки были менее выражены, что привело к более высокому отношению продольного диаметра перегородки к диаметру перегородки в Jh200, составляющем 1,19 ± 0,09 по сравнению с 1,13 ± 0,08 в MSSA1112 ( P <0.001). Клетки как дикого типа, так и мутантные были немного меньше в стационарной фазе роста, но Jh200 сохранял в среднем на 5,2% больший продольный диаметр, чем MSSA1112. Не было видимых различий во внешнем виде клеточной стенки. Интересно, что несколько клеток штамма Jh200 показали аберрантное положение перегородки, которое было параллельно уже инициированной или завершенной перегородке (рис. 3g и h), в то время как ни одна из клеток дикого типа не показывала параллельных перегородок.
3
Морфология клеток.ПЭМ-изображения штамма MSSA1112 дикого типа (a и b) и мутанта Jh200 msrR (c и d). Белый прямоугольник на (a) и (c) указывает на область, показанную с большим увеличением на (b) и (d). Белые полосы указывают 2 мкм на (a) и (c) и 0,4 мкм на (b) и (d). (e и f) Соотношения между продольным диаметром и диаметром перегородки MSSA1112 (e) и Jh200 (f) в экспоненциальной и стационарной фазах роста. Диаметр всех клеток в пяти микроскопических полях (80–120 клеток на штамм и фазу роста) с видимыми перегородками (полными или неполными) измеряли с помощью imagej (Национальные институты здравоохранения NIH).(g и h) Инициирование параллельных перегородок (белые стрелки), наблюдаемое в клетках мутанта msrR Jh200. Белая полоса обозначает 1 мкм.
3
Морфология клеток. ПЭМ-изображения штамма MSSA1112 дикого типа (a и b) и мутанта Jh200 msrR (c и d). Белый прямоугольник на (a) и (c) указывает на область, показанную с большим увеличением на (b) и (d). Белые полосы указывают 2 мкм на (a) и (c) и 0,4 мкм на (b) и (d). (e и f) Соотношения между продольным диаметром и диаметром перегородки MSSA1112 (e) и Jh200 (f) в экспоненциальной и стационарной фазах роста.Диаметр всех клеток в пяти микроскопических полях (80–120 клеток на штамм и фазу роста) с видимыми перегородками (полными или неполными) измеряли с помощью imagej (Национальные институты здравоохранения NIH). (g и h) Инициирование параллельных перегородок (белые стрелки), наблюдаемое в клетках мутанта msrR Jh200. Белая полоса обозначает 1 мкм.
Агрегация клеток и образование биопленок
Когда Jh200 выращивали при постоянном перемешивании в бульоне BHI, наблюдалось усиление седиментации (рис.4а) и кольцо адгезивных бактерий, образовавшееся на границе жидкость – воздух. Комплементация Jh200 с pGC2 msrR , содержащей аллель msrR дикого типа, обращала эффект. На поверхностях полистирола Jh200 образовывал более толстую биопленку, чем MSSA1112, и количество биопленки можно было снова снизить до уровней дикого типа путем комплементации с плазмидой pGC2 msrR (рис. 4b), показывая, что на формирование биопленки действительно влияло msrR инактивация. Распространение биопленки протеиназой К и ДНКseI, но не NaIO 4 (рис.4c), продемонстрировал, что он состоит в основном из белка и внеклеточной ДНК, а не из PIA.
4
Связанные с клеточной поверхностью характеристики (1) MSSA1112, (2) Jh200, (3) MSSA1112 pGC2, (4) Jh200 pGC2 и (5) Jh200 pGC2 msrR . (а) Рост в стеклянных пробирках. (b) Биопленки, окрашенные сафранином, образованные в полистирольных 12-луночных планшетах после выращивания в бульоне BHI с 1% (мас. / об.) глюкозы. (c) Влияние протеиназы K (Prot K), DNAseI и NaIO 4 на образование биопленок мутанта msrR Jh200.(-), необработанный контроль. (d) Рост на агаре BHI с добавлением 0,08% (мас. / об.) Конго красного и 1% (мас. / об.) глюкозы. Приведены соответствующие МИК Конго красного, полученные разведением в LB агаре. (e) Способность к распространению колоний на чашках с агаром BHI 0,24% (мас. / об.) с добавлением 1% (мас. / об.) глюкозы. (f) Относительная гидрофобность клеточной поверхности, проиллюстрированная сродством к гексадекану после роста в бульоне BHI в течение 2, 4, 8 и 24 часов. Данные представляют собой средние и стандартные отклонения от трех повторов репрезентативного эксперимента.Закрытые кружки, MSSA1112; замкнутые треугольники, Jh200; белые кружки, MSSA1112 pGC2; открытые треугольники, Jh200 pGC2; и пустые квадраты, Jh200 pGC2 msrR . (g) Типичные кривые роста MSSA1112 и msrR мутанта Jh200 в бульоне BHI и изменения значения pH культуральной среды во время роста. Закрытые кружки, MSSA1112; замкнутые треугольники, Jh200; и незакрашенные ромбики — значения pH (которые были идентичны для обоих штаммов).
4
Характеристики, связанные с клеточной поверхностью: (1) MSSA1112, (2) Jh200, (3) MSSA1112 pGC2, (4) Jh200 pGC2 и (5) Jh200 pGC2 msrR .(а) Рост в стеклянных пробирках. (b) Биопленки, окрашенные сафранином, образованные в полистирольных 12-луночных планшетах после выращивания в бульоне BHI с 1% (мас. / об.) глюкозы. (c) Влияние протеиназы K (Prot K), DNAseI и NaIO 4 на образование биопленок мутанта msrR Jh200. (-), необработанный контроль. (d) Рост на агаре BHI с добавлением 0,08% (мас. / об.) Конго красного и 1% (мас. / об.) глюкозы. Приведены соответствующие МИК Конго красного, полученные разведением в LB агаре. (e) Способность к распространению колоний на чашках с агаром BHI 0,24% (мас. / об.) с добавлением 1% (мас. / об.) глюкозы.(f) Относительная гидрофобность клеточной поверхности, проиллюстрированная сродством к гексадекану после роста в бульоне BHI в течение 2, 4, 8 и 24 часов. Данные представляют собой средние и стандартные отклонения от трех повторов репрезентативного эксперимента. Закрытые кружки, MSSA1112; замкнутые треугольники, Jh200; белые кружки, MSSA1112 pGC2; открытые треугольники, Jh200 pGC2; и пустые квадраты, Jh200 pGC2 msrR . (g) Типичные кривые роста MSSA1112 и msrR мутанта Jh200 в бульоне BHI и изменения значения pH культуральной среды во время роста.Закрытые кружки, MSSA1112; замкнутые треугольники, Jh200; и незакрашенные ромбики — значения pH (которые были идентичны для обоих штаммов).
Конго красный чувствительность
На красном агаре Конго MSSA1112 и Jh200 образовывали корковые колонии, которые медленно становились черными во время инкубации, появление которых было связано с образованием PIA. Однако корреляция появления колоний на Конго красный агар и производство PIA в золотистого стафилококка спорно (Knobloch и др. , 2002), а также не поддерживается здесь отсутствием восприимчивости биопленки Jh200 к метапериодата .Замечательным наблюдением было уменьшение размера колоний мутанта Jh200 по сравнению с колониями дикого типа на чашках с конго красным (фиг. 4d), хотя колонии не различались по размеру на чашках без конго красного (данные не показаны). Снижение роста Jh200 может быть связано с сильно увеличенной восприимчивостью Jh200 к конго красному, при этом MIC снизился с 16 до <0,5 г л -1 . Устойчивость к конго красному восстанавливали путем введения плазмиды pGC2 msrR . Способность Jh200 связывать конго красный была идентична способности MSSA1112 в анализе связывания in vitro (данные не показаны).
Укрывистость
MSSA1112 быстро распространяется на мягком агаре, образуя гигантские колонии с дендритными границами. Эта способность к распластыванию явно снижалась при делеции msrR (фиг. 4e). На чашках с добавлением хлорамфеникола для поддержания плазмид, контролирующих или дополняющих pGC2, все участки поверхности выглядели более гладкими (рис. 4e, 3-5). Комплементация мутанта msrR с pGC2 msrR восстановила распространение.
5
Выживаемость нематод, которым скармливали штамм дикого типа MSSA1112 (кружки, n, = 90) и msrR мутант Jh200 (треугольники; n = 90). Данные представляют один из трех независимых экспериментов.
5
Выживание нематод, которых кормили штаммом дикого типа MSSA1112 (кружки, n = 90) и msrR мутант Jh200 (треугольники; n = 90). Данные представляют один из трех независимых экспериментов.
Относительная гидрофобность клеточной поверхности
Относительную гидрофобность клеточной поверхности оценивали в течение цикла роста с помощью MATH (рис. 4f и g). MSSA1112 показал постоянное высокое сродство к гексадекану (> 90%) на протяжении всей кривой роста. У мутанта Jh200 относительная гидрофобность клеточной поверхности снижалась через 4 ч при переходе к стационарной фазе роста со сродством к гексадекану около 50%; и снова увеличился через 8 часов, достигнув значений дикого типа через 24 часа.Поразительно, что снижение гидрофобности Jh200 коррелировало со снижением значения pH в среде. Мутант, несущий плазмиду pGC2 msrR , вел себя как дикий тип. Образцы 4-часовых культур MSSA1112 и Jh200 исследовали под микроскопом после инкубации с гексадеканом. Хотя капли гексадекана были редко заселены мутантом msrR , они были полностью покрыты клетками дикого типа (данные не показаны).
Содержание тейхоевой кислоты
Сообщается, что различия в характеристиках клеточной поверхности, такие как изменение способности к растеканию и изменения гидрофобности, зависят от тейхоевых кислот и их состава (Fedtke et al., 2007; Kaito & Sekimizu, 2007). Измерения содержания фосфора дикого типа (0,85 ± 0,07 мкмоль, мг -1 очищенных клеточных стенок) и мутантных клеточных стенок (0,63 ± 0,07) показали отчетливое и статистически значимое снижение количества WTA на 25% в мутанте ( P <0,05, тест Стьюдента t -тест). В клеточной стенке комплементарного мутанта Jh200 pGC2 msrR (0,86 ± 0,01) можно было измерить уровни фосфора дикого типа. Паттерны отпечатков пальцев муропептида оставались идентичными у дикого типа и мутанта msrR (данные не показаны).
Вирулентность
Caenorhabditis elegans убийство было сильно ослаблено в MSSA1112 msrR нуль-мутанте Jh200 (рис. 5) ( P <0,01, тест логарифмического ранга), подтверждая аналогичные результаты Bae et al. (2004) в штамме Newman. Более того, пониженная вирулентность Jh200 была подтверждена на крысиной модели экспериментального эндокардита. В то время как все животные ( n = 9), зараженные ID 90 штамма дикого типа MSSA1112 (10 4 КОЕ), могли быть инфицированы, только у семи из 16 (43%) крыс, зараженных Jh200, развились инфицированные вегетации. ( P <0.05 по χ 2 -тест). Однако бактериальная нагрузка в инфицированных растениях была идентична у дикого типа (в среднем 7,8 ± 2 log 10 КОЕ г -1 ) и мутанта msrR (7,53 ± 2 log 10 КОЕ г -1 ). Восемь из девяти животных, инфицированных диким типом, и семь из 16 животных, инфицированных мутантом msrR , показали положительные культуры крови ( P <0,05, χ 2 -тест). Инфекцию также оценивали в селезенке. У всех животных были инфицированы селезенки, независимо от вызывающего штамма, что свидетельствует о соответствующей инокуляции животных.
Обсуждение
Члены семейства LytR-CpsA-Psr связаны с поддержанием клеточной стенки и свойствами оболочки, такими как автолиз, биосинтез капсулы и образование биопленок, и, как сообщается, влияют на вирулентность и выполняют регуляторную функцию (Lazarevic et al. , 1992; Cieslewicz et al. , 2001; Chatfield et al. , 2005; Wen et al. , 2006).
Микромассивы показали, что делеция msrR оказывала незначительное влияние на глобальный транскриптом во время раннего роста, в момент времени наивысшей транскрипции msrR .MsrR-зависимое снижение экспрессии sarA , наблюдаемое Rossi et al. (2003) не могли быть подтверждены ни данными микроматрицы, ни последовательными Нозерн-блоттингами, предполагая, что это, вероятно, было временным эффектом и / или зависело от условий роста.
Инактивация msrR оказала заметное влияние на свойства клеточной поверхности, что привело к заметному снижению гидрофобности клеточной поверхности. Эффект был кратковременным и восстановился в ранней стационарной фазе.Таким образом, стабильно высокая гидрофобность поверхности S. aureus дикого типа может зависеть от MsrR или фактора, на который влияет MsrR в зависимости от фазы роста. Напротив, Накано и др. (2005) наблюдали повышенную гидрофобность клеточной поверхности при делеции brpA в S. mutans . Поскольку MsrR более близок к Psr Enterococcus , чем к BrpA (Hübscher et al. , 2008), он может иметь различную биологическую роль, даже если он принадлежит к тому же семейству белков и имеет функциональное сходство.
MsrR, по-видимому, предотвращает образование биопленок, потому что его делеция увеличивает агрегацию от клетки к клетке. Биопленка мутанта msrR не зависела от PIA, а состояла из белка и ДНК. Описаны PIA-независимые биопленки (Fitzpatrick et al. , 2005; Toledo-Arana et al. , 2005), а компоненты, связанные с образованием биопленок, включают белки (Kajimura et al. , 2005; Biswas et al. др. , 2006), тейхоевые кислоты и ДНК (Садовская и др., 2006; Райс и др. , 2007). Райс (2007) продемонстрировал, что снижение высвобождения ДНК из-за снижения лизиса клеток объясняет дефект в образовании биопленок у мутантов cidA . Мутант msrR , однако, не проявлял измененной автолитической активности (данные не показаны), и результаты микрочипов не указывали на измененную экспрессию генов известных ключевых компонентов образования биопленок. Подобно инактивации msrR в S. aureus , инактивации brpA в S.mutans также вызывал повышенное оседание клеток (Wen & Burne, 2002), но в отличие от мутантов msrR , мутанты brpA показали ограниченное образование биопленок и повышенную автолитическую активность (Wen & Burne, 2002; Nakano et al. ). , 2005; Вэнь и др. , 2006).
Интересно, что мутанты brpA продуцировали более длинные цепи, чем у дикого типа, что может указывать на дефект разделения клеток (Wen & Burne, 2002; Chatfield et al., 2005; Накано и др. , 2005; Wen et al. , 2006). Хотя скорость автолиза мутанта msrR не отличалась от мутанта дикого типа, увеличенный размер клеток и случайное появление параллельных перегородок предполагали нарушение разделения клеток и аберрантное инициирование и расположение перегородки. В то время как часть мутантных клеток была больше, чем клетки дикого типа, на толщину клеточной стенки и внешний вид это не повлияло, и не было изменений в составе пептидогликана.Эти результаты предполагают, что на синтез пептидогликана не влиял MsrR. Увеличенные клетки и образование параллельных перегородок были описаны ранее у S. aureus у условного мутанта pbpA (Pereira et al. , 2007). Как и в случае мутанта msrR , были затронуты только некоторые клетки.
Интересно, что мутант msrR был очень чувствителен к красителю Конго красный. И дикий тип, и мутант обладали одним белком, который специфически связывал конго красный со сходной аффинностью связывания (данные не показаны), что противоречит прямому взаимодействию между конго красным и MsrR.Существуют различные возможные механизмы взаимодействия Конго красного, которые включают образование водородных связей через атомы H аминогрупп, электростатическое взаимодействие через отрицательно заряженные сульфонатные группы, гидрофобные взаимодействия через ароматические кольца и стерическую интеркаляцию между β- листы (Nilsson, 2004). Следовательно, присутствие конго красного также может неспецифически влиять на соединения клеточной оболочки, например, путем введения отрицательного заряда или индукции конформационных изменений.Следовательно, измененные свойства клеточной поверхности, такие как повышенная агрегация и изменения гидрофобности, могут сделать мутант msrR более восприимчивым к конго красному.
Kaito и Sekimizu заметили, что S. aureus способен распространяться на влажных поверхностях, таких как чашки с полутвердым агаром (Kaito & Sekimizu, 2007). Подвижность бактериальной поверхности зависит от поверхностно-активных соединений клеточной оболочки, которые улучшают смачиваемость (Harshey, 2003), и от быстрого роста (Kinsinger et al., 2005). Для S. aureus было показано, что мутации в tagO, dlt или ypfP , которые участвуют в биосинтезе WTA или липотейхоевой кислоты, снижают способность к распространению, и было предложено, что тейхоевые кислоты могут действовать как поверхностно-активные вещества. (Kaito & Sekimizu, 2007). Продукты оперона dltABCD важны для аланилирования тейхоевых кислот, а YpfP участвует в синтезе гликолипидов, а недостаток этого белка значительно снижает количество липотейхоевых кислот (Peschel et al., 1999; Fedtke et al. , 2007). На скорость роста не влияла делеция msrR , но можно было обнаружить уменьшенное содержание WTA, которое могло быть дополнено pGC2 msrR . Известно, что тейхоевые кислоты влияют на регуляцию автолизинов (Bierbaum & Sahl, 1987), и оба мутанта dlt и ypfP обладают пониженной автолитической активностью и дефектами в образовании биопленок (Peschel et al. , 1999; Fedtke et al. , 2007).Однако на автолиз не повлияли мутанты msrR , и образование биопленок было усилено, что подразумевает изменения, отличные от тех, которые индуцируются dlt или ypfP . В качестве альтернативы можно предположить, что повышенная агрегация клеток мутанта msrR предотвращала распространение на чашках с полутвердым агаром, и что физико-химические изменения свойств клеточной поверхности усиливали фенотип.
Поверхностные характеристики патогена могут в значительной степени способствовать его инфекционности (Jordan et al., 2008). Следовательно, эффекты MsrR на клеточной оболочке S. aureus могут быть причиной ослабленной способности мутанта с делецией S. aureus msrR уничтожать нематод, а также его пониженной вирулентности на модели эндокардита крыс. Снижение вирулентности также может быть связано с уменьшением WTA, поскольку эта поверхностная структура ранее была вовлечена в патогенность стафилококков (Weidenmaier et al. , 2005a, b). Может показаться интригующим, что хотя мутант msrR продуцирует больше биопленок, он менее вирулентен in vivo .Однако отсутствие корреляции между образованием биопленок и вирулентностью ранее наблюдалось в нескольких экспериментальных моделях, включая модель эндокардита (Kristian et al. , 2004; Bizzini et al. , 2006).
Было показано, что члены семейства белков LytR-CpsA-Psr, описанные до сих пор, влияют на свойства клеточной оболочки. Это исследование добавляет MsrR к этой группе, показывая, что инактивация MsrR влияет на размер клеток, агрегацию, образование биопленок, распространение колоний, восприимчивость к конго красному и содержание WTA.MsrR, по-видимому, особенно важен во время экспоненциального роста, когда потребность в питательных веществах высока и клетки подвергаются разделению. Это хорошо соответствует высокому уровню экспрессии msrR на ранних стадиях роста (Rossi et al. , 2003). Более того, это исследование подтвердило и расширило предыдущие результаты, показывающие, что MsrR важен для вирулентности стафилококков. Механизм действия MsrR остается неясным, но пониженные уровни WTA в мутанте msrR предполагают влияние на этот главный компонент оболочки стафилококковых клеток, что будет изучено в дальнейшем.
Благодарности
Мы благодарны Группе бактериальных микроматриц в Сент-Джорджесе, Лондонский университет, за предоставление оборудования для микроматриц, а также У. Луэти (Центр микроскопии и анализа изображений, Цюрихский университет) за ТЕМ-анализы. Это исследование было поддержано Forschungskredit der Universität Zürich No. 54232501, выданным NMcC, грантом Европейской комиссии LSHM-CT-2003-503335 (SBF03.0098) и грантом Швейцарского национального научного фонда 31-117707 для B.B.-B., и PMPDB3-114323 в P.S.M.
Список литературы
(
1960
)Роль полиаминов в нейтрализации ДНК бактериофагов
.J Biol Chem
235
:769
—775
.(
2004
)Staphylococcus aureus генов вирулентности, идентифицированных с помощью мутагенеза Bursa aurealis и уничтожения нематод
.P Natl Acad Sci USA
101
:12312
—12317
.(
1983
)Вставная инактивация устойчивости стафилококков к метициллину с помощью Tn 551
.Дж Бактериол
154
:479
—487
.(
1987
)Автолитическая система Staphylococcus simulans 22: влияние катионных пептидов на активность N-ацетилмурамоил-1-аланинамидазы
.Дж Бактериол
169
:5452
—5458
.(
2006
)Активность основного стафилококкового автолизина Ат
.FEMS Microbiol Lett
259
:260
—268
.(
2006
)Отсутствие in vitro образования биопленок не снижает вирулентность Streptococcus gordonii при экспериментальном эндокардите
.FEMS Immunol Med Mic
48
:419
—423
.(
2004
)Регулирование детерминант вирулентности у Staphylococcus aureus : сложность и применение
.FEMS Microbiol Ред.
28
:183
—200
.(
1997
)Замена гена в Staphylococcus carnosus и Staphylococcus xylosus
.FEMS Microbiol Lett
151
:1
—8
.(
2005
)Предполагаемый регулятор автолизина LytR в Streptococcus mutans играет роль в делении клеток и регулируется фазой роста
.Микробиология
151
:625
—631
.(
1992
)Регуляция экспрессии экзопротеинов в Staphylococcus aureus с помощью локуса ( sar ), отличного от agr
.P Natl Acad Sci USA
89
:6462
—6466
.(
2004
)Регуляция детерминант вирулентности in vitro и in vivo в Staphylococcus aureus
.FEMS Immunol Med Mic
40
:1
—9
.(
1999
)SarA, глобальный регулятор детерминант вирулентности в Staphylococcus aureus , связывается с консервативным мотивом, необходимым для sar -зависимой регуляции гена
.J Biol Chem
274
:37169
—37176
.(
2001
)Функциональный анализ в группе B Streptococcus типа Ia кластера генов, участвующих в продукции внеклеточных полисахаридов различными видами стрептококков
.J Biol Chem
276
:139
—146
.(
2001
)Идентификация на основе профилирования транскрипции генов Staphylococcus aureus , регулируемых локусами agr и / или sarA
.Дж Бактериол
183
:7341
—7353
.(
1997
)Сравнение левофлоксацина с ципрофлоксацином, флуклоксациллином или ванкомицином при лечении экспериментального эндокардита, вызванного метициллин-чувствительным или резистентным Staphylococcus aureus
.Антимикробные агенты Ch
41
:1662
—1667
.(
2007
)A Staphylococcus aureus ypfP , мутант с сильно пониженным содержанием липотейхоевой кислоты (LTA): LTA регулирует свойства бактериальной поверхности и активность автолизина
.Mol Microbiol
65
:1078
—1091
.(
2005
)Доказательства icaADBC -независимого механизма развития биопленок в метициллин-устойчивых клинических изолятах Staphylococcus aureus
.J Clin Microbiol
43
:1973
—1976
.(
2007
)Отсутствие взаимосвязи между биосинтезом пуринов и устойчивостью к ванкомицину у Staphylococcus aureus : предостережение для интерпретации микроматриц
.Антимикробные агенты Ch
51
:1274
—1280
.(
2001
)σ Активность B зависит от RsbU в Staphylococcus aureus
.Дж Бактериол
183
:1843
—1852
.(
2003
)Подвижность бактерий на поверхности: множество путей к общей цели
.Annu Rev Microbiol
57
:249
—273
.(
1982
)Естественное течение эндокардита аортального клапана у крыс
.Infect Immun
37
:127
—131
.(
2008
)Филогенетическое распределение и топология мембран семейства белков LytR-CpsA-Psr
.BMC Genomics
9
:617
.(
2008
)Реакция на стресс клеточной оболочки у грамположительных бактерий
.FEMS Microbiol Ред.
32
:107
—146
.(
2007
)Распространение колоний в Staphylococcus aureus
.Дж Бактериол
189
:2553
—2557
.(
2005
)Идентификация и молекулярная характеристика N -ацетилмурамил-1-аланинамидазы Sle1, участвующей в разделении клеток Staphylococcus aureus
.Mol Microbiol
58
:1087
—1101
.(
2004
)Мутации PBP 2a, вызывающие очень высокий уровень устойчивости к бета-лактамам
.Антимикробные агенты Ch
48
:453
—459
.(
2005
)Генетические требования для распространения калий-зависимых колоний у Bacillus subtilis
.Дж Бактериол
187
:8462
—8469
.(
2002
)Оценка различных методов обнаружения образования биопленок у Staphylococcus aureus
.Med Microbiol Immun
191
:101
—106
.(
1983
)Структурный ген экзотоксина синдрома токсического шока не передается через профаг
.Природа
305
:709
—712
.(
2004
)Способность к образованию биопленок не влияет на вирулентность Staphylococcus aureus и реакцию хозяина на модели инфицирования клетки ткани мыши
.Microb Pathog
36
:237
—245
.(
1992
)Секвенирование и анализ дивергона Bacillus subtilis lytRABC : регуляторная единица, включающая структурные гены N-ацетилмурамоил-l-аланинамидазы и ее модификатора
.J Gen Microbiol
138
:1949
—1961
.(
2007
)Enterococcus faecalis мутации, влияющие на вирулентность в хозяине модели Caenorhabditis elegans
.Infect Immun
75
:2634
—2637
.(
2003
)Тейхоевые кислоты не требуются для клеточных стенок Streptococcus pneumoniae и Staphylococcus aureus , чтобы вызвать высвобождение фактора некроза опухоли моноцитами периферической крови
.Infect Immun
71
:3707
—3713
.(
2006
)Сверхэкспрессия генов стимулятора клеточной стенки в клинических изолятах Staphylococcus aureus , проявляющих устойчивость к ванкомицину-промежуточному — S. aureus по типу ванкомицина
.Дж Бактериол
188
:1120
—1133
.(
2006
)Зависимость от штамма стимула, вызванного повреждением клеточной стенки, у Staphylococcus aureus
.Biochim Biophys Acta
1760
:1475
—1481
.(
2005
)Вклад регуляторного белка А биопленки Streptococcus mutans в системную вирулентность
.Микробы заражают
7
:1246
—1255
.(
2004
)Методы изучения образования амилоидных фибрилл in vitro
.Методы
34
:151
—160
.(
2007
)Роль PBP1 в делении клеток Staphylococcus aureus
.Дж Бактериол
189
:3525
—3531
.(
1999
)Инактивация оперона dlt в Staphylococcus aureus придает чувствительность к дефенсинам, портегринам и другим антимикробным пептидам
.J Biol Chem
274
:8405
—8410
.(
2005
)Профиль дифференциальной экспрессии генов Staphylococcus aureus , культивируемых в биопленочных и планктонных условиях
.Appl Environ Microb
71
:2663
—2676
.(
2007
)Регулятор муреингидролазы cidA способствует высвобождению ДНК и развитию биопленок у Staphylococcus aureus
.P Natl Acad Sci USA
104
:8113
—8118
.(
1980
)Привязка бактерий к углеводородам: простой метод измерения гидрофобности клеточной поверхности
.FEMS Microbiol Lett
9
:29
—33
.(
2003
)MsrR, предполагаемый элемент, связанный с клеточной оболочкой, участвующий в ослаблении Staphylococcus aureus sarA
.Антимикробные агенты Ch
47
:2558
—2564
.(
2006
)Углеводородные компоненты биопленок, продуцируемые in vitro некоторыми штаммами стафилококков, связанными с инфекциями ортопедических протезов
.FEMS Immunol Med Mic
47
:75
—82
.(
2003
)Переосмысление роли psr в устойчивости к β-лактамам и клеточном автолизе Enterococcus hirae
.Дж Бактериол
185
:5925
—5935
.(
2008
)Staphylococcus aureus CcpA влияет на образование биопленок
.Infect Immun
76
:2044
—2050
.(
2003
)Caenorhabditis elegans в качестве модельного хозяина для Staphylococcus aureus , патогенез
.Инфекционный иммунитет
71
:2208
—2217
.(
1988
)Гены устойчивости к ртути и тетрациклину и фланкирующие повторы, связанные с устойчивостью к метициллину, на хромосоме Staphylococcus aureus
.Моль Микобиол
2
:289
—292
.(
2007
)Обширные и общегеномные изменения профиля транскрипции Staphylococcus aureus , вызванные модулированием транскрипции гена синтеза клеточной стенки murF
.Дж Бактериол
189
:2376
—2391
.(
2005
)Staphylococcus aureus развивает альтернативную, ica -независимую биопленку в отсутствие двухкомпонентной системы arlRS
.Дж Бактериол
187
:5318
—5329
.(
2003
)Полногеномное транскрипционное профилирование ответа Staphylococcus aureus на активные антибиотики клеточной стенки выявляет стимул стресса клеточной стенки
.Микробиология
149
:2719
—2732
.(
2005a
)DltABCD- и MprF-опосредованные модификации клеточной оболочки Staphylococcus aureus придают устойчивость к микробицидным белкам тромбоцитов и вносят свой вклад в вирулентность в модели
эндокардита кроликов.Infect Immun
73
:8033
—8038
.(
2005b
)Недостаток тейхоевых кислот в стенке у Staphylococcus aureus приводит к снижению взаимодействий с эндотелиальными клетками и ослаблению вирулентности на модели эндокардита на кроликах
.J Инфекция Dis
191
:1771
—1777
.(
2002
)Функциональный геномный подход к идентификации генов, необходимых для развития биопленок Streptococcus mutans
.Appl Environ Microb
68
:1196
–1203
.(
2006
)Влияние BrpA на критические признаки вирулентности Streptococcus mutans
.Дж Бактериол
188
:2983
—2992
.(
2005
)Разработка, валидация и применение микроматрицы продукта ПЦР с семью штаммами Staphylococcus aureus для сравнительной геномики
.Appl Environ Microb
71
:7504
—7514
.Дополнительная информация
Дополнительную вспомогательную информацию можно найти в онлайн-версии этой статьи:
Таблица S1.Дифференциально регулируемые гены мутанта с делецией msrR Jh200 в фазе экспоненциального роста.
Обратите внимание: Wiley-Blackwell не несет ответственности за содержание или функциональность любой вспомогательной информации, предоставленной авторами. Любые вопросы (кроме отсутствующих материалов) следует направлять соответствующему автору статьи.
© 2009 Федерация европейских микробиологических обществ. Опубликовано Blackwell Publishing Ltd. Все права защищены
.