Apresys pro 550: Apresys — лучшие лазерные дальномеры!

PowerLine 800 излучает невидимые и безопасные для человеческого глаза инфракрасные лазерные импульсы. Условия освещенности (пасмурное небо или солнечный день) влияют на измерения прибора. Наименьшее освещение (пасмурный день) дают максимальную дальность. На результаты измерения также оказывает влияние и цвет и форма объекта. Черный цвет является поглощающим, а красные и блестящие поверхности обладают большим отражением и дают возможность для определения дальности более удаленных предметов. Малые размеры цели наиболее трудны для измерения дальности. Если поверхности цели перпендикулярны лазерному лучу, то обеспечивается более точное измерение дистанции. Данная модель подходит для измерения дальности до телеграфных столбов, мостов. Окуляр с удаленным выходным зрачком, с возможностью диоптрийной подстройки.

Особенности:

• Точные измерения дистанций от 5 до 800 метров
• Удобное управление
• Измеряет углы и высоту
• Увеличение 6 крат
• Многослойное просветление всех оптических элементов
• Ударопрочный корпус и защита оптических элементов от вибрации
• Водонепроницаемый корпус выдерживает погружение в воду на глубину до 1 метра
• Фокусировка окуляром

Характеристики:

• Увеличение: 6 крат
• Диаметр объектива: 25 мм
• Поле зрения: 122 м/1000м
• Диаметр выходного значка: 4,1 мм
• Дистанция измерения: от 5 до 800 м
• Погрешность измерения дистанции: +/- 0,5 м
• Диапазон измерения угла: +/- 70 градусов
• Погрешность в измерении угла: +/- 0,1 градуса
• Экран: LCD
• Питание: 3 В
• Размеры: 106*68*36 мм
• Вес: 190 г
• Фокусировка: Вращением окуляра

Комплектация:

• Чехол
• Ремешок на руку
• Мягкий футляр с нашейным ремнем
• Гарантийный талон и Инструкция на русском языке

Тромбоцитферез — обзор | Темы ScienceDirect

Тромбоциты

Переливание тромбоцитов показано для профилактической или гемостатической терапии лицам с приобретенной или врожденной тромбоцитопенией или тромбоцитопатией. Компоненты тромбоцитов получают либо из донорской цельной крови, либо из сбора афереза. Для тромбоцитов, полученных из цельной крови (тромбоцитов), метод подготовки должен давать не менее 5,5 × 10 ¹⁰ тромбоцитов на единицу не менее 75% единиц, протестированных на предприятии-изготовителе.В случае тромбоцитов, полученных из цельной крови, обычно непосредственно перед переливанием объединяют от 4 до 6 единиц для получения дозы, сравнимой с одной единицей тромбоцитов, полученных из афереза. Для тромбоцитов, полученных из афереза ​​(тромбоциты, ферез), метод сбора должен давать не менее 3 × 10 ¹¹ тромбоцитов на единицу не менее 90% единиц, протестированных на предприятии-изготовителе. Коллекции тромбоцитов с большим выходом можно разделить на две отдельные единицы тромбоцитов, полученных из афереза, также известные как разделений , при условии, что количество тромбоцитов в каждой единице больше или равно 3 × 10 ¹¹ .Условия хранения тромбоцитов, такие как объем плазмы, перемешивание и температура, должны быть оптимизированы для поддержания адекватного pH выше или равного 6,2 в 90% единиц, протестированных в конце утвержденного периода хранения. Как и в случае с эритроцитами, компоненты тромбоцитов часто модифицируются за счет уменьшения лейкоцитов, а в особых условиях тромбоциты могут быть дополнительно изменены облучением или промывкой. Кроме того, тромбоциты, полученные из афереза, могут быть перекрестно сопоставлены или сопоставлены по HLA для аллоиммунизированных лиц, у которых наблюдается плохой прирост тромбоцитов при случайных переливаниях тромбоцитов.

По сравнению с другими компонентами тромбоциты более чувствительны к различным условиям хранения. Хотя хранение в холодильнике или замораживании может показаться идеальным для замедления разрушения клеток и замедления роста бактерий, хранение тромбоцитов в холодильнике приводит к значительно худшему выживанию после переливания in vivo по сравнению с тромбоцитами, хранящимися при комнатной температуре. ^97–99 Кроме того, тромбоциты, которые остаются нетронутыми во время хранения, менее эффективны, чем тромбоциты, которые перемешиваются на горизонтальной качалке, процесс, который помогает обеспечить оптимальный газообмен и поддержание pH. ¹²⁵ Таким образом, для оптимального хранения тромбоциты необходимо осторожно перемешивать и поддерживать в диапазоне температур от 20 ° C до 24 ° C. Во время транспортировки период времени, в течение которого тромбоциты остаются без осторожного перемешивания, не должен превышать 24 часов, поскольку прерывание перемешивания более чем на 1 день приводит к значительному повреждению компонента. ¹²⁶

Основная проблема с хранением тромбоцитов заключается в том, что комнатная температура и богатая питательными веществами плазма способствуют размножению бактерий. ¹²⁷ Чтобы снизить риск значительной бактериальной нагрузки, утвержденный период хранения тромбоцитов ограничен 5 днями после сбора, ¹²⁸ , даже если тромбоциты, хранящиеся в течение более длительных периодов, показывают приемлемую выживаемость in vivo. ^{31, 129} Даже при 5-дневном хранении бактериальное заражение тромбоцитов с последующей связанной с переливанием бактериемией или сепсисом было основной причиной заболеваемости и смертности при переливании крови. ¹ Для решения этой проблемы в 23-м издании Стандарта для банков крови и служб переливания крови AABB ввел стандарт для учреждений крови, предусматривающий наличие методов, ограничивающих и обнаруживающих бактериальное заражение тромбоцитов.

Учитывая неспецифический характер стандарта, для тестирования бактерий используются многие методы, в том числе окрашивание по Граму или бактериальный посев, тестирование в месте оказания медицинской помощи путем определения pH / глюкозы и визуализация отсутствия завихрения, что является признаком нежизнеспособные тромбоциты. ¹ Основным ограничением методов некультивирования является недостаточная чувствительность (от 10 ⁶ до 10 ⁷ КОЕ / мл) по сравнению с системами бактериального культивирования (от 10 ² до 10 ³ КОЕ / мл или меньше) . ^130–133 Следовательно, следует ожидать большего количества ложноотрицательных результатов с системами, не относящимися к культуре. Несмотря на большую чувствительность, метод бактериальной культуры имеет ограничения, связанные с большим объемом образца, необходимого для тестирования, и более длительным ожиданием результатов теста. В случае последнего ограничения тромбоцитарная единица может быть распределена и перелита до получения зарегистрированного результата посева, поэтому бактериальный статус во время или момент переливания может быть неизвестен. Как правило, для тромбоцитов, полученных из цельной крови, чаще используются методики по месту оказания медицинской помощи, поскольку объем, необходимый для бактериального посева, представляет собой более значительную потерю для этого продукта тромбоцитов меньшего объема.Тромбоциты, полученные из афереза, как продукт большего объема, лучше поддаются отбору образцов для бактериальной культуры и, следовательно, чаще тестируются методом бактериальной культуры с использованием образца, полученного в течение 24-48 часов после хранения. При использовании всех методологий, если будет получен действительно положительный результат, предприятие обязано поместить продукт в карантин, идентифицировать контаминирующий организм и, если он уже распространен, уведомить клиента и забрать продукт, если он не был перелит. Если продукт был перелит, необходимо уведомить клиническую службу для надлежащей оценки и лечения реципиента переливания.

Продленное (7-дневное) хранение тромбоцитов

Тромбоциты при комнатной температуре хранились до 2 недель с приемлемой терапевтической эффективностью. ¹⁰² Преимуществами расширенного хранения тромбоцитов являются улучшенная логистика, повышенная гибкость запасов и снижение затрат, связанных с уменьшением количества устаревших. ¹³⁴ Хотя 7-дневное хранение было ранее одобрено FDA в 1980-х годах, ³¹ обеспокоенность повышенным риском связанного с переливанием крови сепсиса при длительном хранении при комнатной температуре побудила FDA ограничить хранение тромбоцитов до 5 дней.Однако с повышением чувствительности систем обнаружения бактерий для тестирования тромбоцитов, расширенное хранение тромбоцитов снова стало возможным. ^{133, 135} Позиция FDA по 7-дневному хранению тромбоцитов в настоящее время эволюционирует. В 2003 году FDA одобрило с ограничениями использование специальных систем сбора и хранения тромбоцитов для 7-дневного хранения тромбоцитов (COBE Spectra Apheresis System и Trima Automated Blood Collection System, Gambro BCT, Inc., Лейквуд, Колорадо.). В настоящее время объекты, одобренные FDA для 7-дневного хранения, должны соответствовать определенному протоколу бактериального тестирования, а утвержденные предприятия должны участвовать в постмаркетинговом исследовании применяемого протокола. ¹³⁶

Предварительное хранение тромбоцитов

Исследования объединенных перед хранением тромбоцитов, полученных из цельной крови, показали удовлетворительные свойства in vitro и in vivo. ^137–139 Хотя это обычная практика в Европе с тромбоцитами лейкоцитов, предварительное хранение тромбоцитов, полученных из цельной крови, не было одобрено в США из-за опасений по поводу повышенного риска роста бактерий в пулах тромбоцитов перед хранением. ¹⁴⁰ С введением обязательного бактериального тестирования тромбоцитов в Соединенных Штатах стало очевидно, что наиболее чувствительные методы обнаружения бактерий основаны на автоматизированном бактериальном культивировании. Учитывая относительно большой объем образца, необходимый для бактериальной культуры, и увеличенное количество единиц для тестирования при однократном переливании, такие методы обычно не применяются для бактериального тестирования тромбоцитов, полученных из цельной крови. Обычно из-за этих ограничений менее чувствительные методы используются для бактериального тестирования тромбоцитов, полученных из цельной крови, по сравнению с тромбоцитами, полученными из афереза.Предварительное хранение тромбоцитов, полученных из цельной крови, обеспечивает достаточный объем образца для более чувствительных автоматизированных методов культивирования бактерий, тем самым повышая вероятность обнаружения бактерий и повышая безопасность тромбоцитов, полученных из цельной крови. Следовательно, в Соединенных Штатах возобновился интерес к предварительному хранению тромбоцитов, полученных из цельной крови. ^141–143 Недавно FDA одобрило систему предварительного накопления лейкоредукции и объединения тромбоцитов, полученных из цельной крови, которая содержит интегрированную бактериальную культуральную систему для автоматического обнаружения бактерий (Acrodose PL, Pall Corporation, East Hills, NY).С улучшенными технологиями доступность и использование объединенных тромбоцитов предварительного хранения в Соединенных Штатах, вероятно, увеличится.

Ожидается, что к 2023 году мировой рынок афереза ​​достигнет 4200,6 миллионов долларов

ПОРТЛЕНД, Орегон и Пуна, Индия, 29 мая 2018 г. / PRNewswire / —

Согласно новому отчету, опубликованному Allied Market Research под названием «Рынок афереза ​​ по продуктам, методам, процедурам, компонентам и конечным пользователям: глобальный анализ возможностей и отраслевой прогноз, 2017–2023 годы », мировой рынок афереза ​​оценивался в 2560 долларов.4 миллиона долларов в 2016 году и, по прогнозам, к 2023 году достигнет 4200,6 миллиона долларов, при этом среднегодовой темп роста с 2017 по 2023 год составит 7,3%. На сегмент одноразового использования и реагентов пришлось четыре девятых от общей доли рынка в 2016 году.

(Логотип: https://mma.prnewswire.com/media/636519/Allied_Market_Research_Logo.jpg)

Система афереза ​​помогает в сборе и отделении компонентов крови для донорства. Кроме того, эта система может выполнять удаление или замену компонентов крови для терапевтических процедур.Американский национальный Красный Крест предлагает различные услуги терапевтического афереза ​​в США, включая плазмаферез, фотоферез, аферез ЛПНП и сбор стволовых клеток. Кроме того, в центре работает квалифицированный и специализированный персонал для проведения процедур афереза, сохраняя при этом доступность и доступность. Увеличение количества таких центров крови по всему миру значительно стимулирует рост рынка афереза.

Запросите образец отчета по адресу: https: // www.alliedmarketresearch.com/request-sample/2855

Кроме того, рост правительственных инициатив по продвижению донорства крови в развивающихся странах, таких как Китай и Индия, способствует росту рынка. Например, Twitter недавно запустил социальную инициативу под названием BloodMatters в Индии в марте 2018 года. Twitter сотрудничал с горячей линией добровольного донорства крови под названием Blood Donors. Более того, в 2014 году в Китае наблюдалось увеличение количества сдач крови, что привело к увеличению количества центров крови в стране.Такие обстоятельства положительно сказываются на росте рынка.

Метод центрифугирования принес самый высокий доход в 2016 году и, как ожидается, сохранит это доминирующее положение в течение всего прогнозируемого периода. Это связано с тем, что центрифугирование считается стандартным методом афереза ​​и пользуется большим спросом в индустрии крови во всем мире. Однако ожидается, что сегмент мембранного разделения покажет самый высокий темп роста в течение прогнозируемого периода из-за роста спроса на аферез мембранного разделения, поскольку он предотвращает потребность в замещающих жидкостях, не истощая факторы свертывания крови.

В зависимости от процедуры рынок делится на донорский / автоматизированный аферез и терапевтический аферез. Ожидается, что донорский / автоматизированный аферез будет доминировать на мировом рынке в течение всего прогнозируемого периода из-за увеличения разрыва между поставками крови и продуктами крови, что облегчает потребность в использовании аппаратов для афереза. Более того, рост числа процедур афереза ​​в нескольких областях, таких как гематология, неврология и онкология, способствовал устойчивому росту этого сегмента.Ожидается, что терапевтический аферез будет расти самыми высокими темпами с 2017 по 2023 год.

Для запроса о покупке: https://www.alliedmarketresearch.com/purchase-enquiry/2855

Ключевые выводы рынка афереза:

• Ожидается, что в сегменте тромбоцитов (тромбоцитферез) будут зарегистрированы самые высокие темпы роста с 2017 по 2023 год.
• Центры крови принесли максимальную выручку в 2016 г., и ожидается, что эта тенденция сохранится на протяжении всего прогнозного периода.
• Северная Америка доминировала на мировом рынке афереза, заняв максимальную долю в 2016 году, и ожидается, что эта тенденция сохранится в течение прогнозируемого периода.
• Сегмент центрифугирования с прерывистым потоком доминировал на рынке центрифугирования-афереза ​​в 2016 году и, как ожидается, сохранит эту тенденцию в течение прогнозируемого периода.
• По оценкам, фотоферез демонстрирует самый высокий среднегодовой темп роста 9,3% с 2017 по 2023 год на рынке терапевтического афереза.

Ожидается, что в Азиатско-Тихоокеанском регионе будут наблюдаться самые высокие темпы роста за весь прогнозируемый период из-за высокой численности населения, роста располагаемых доходов и повышения осведомленности пациентов о донорстве крови.Кроме того, рост заболеваемости денге в странах Азиатско-Тихоокеанского региона является ключевым фактором роста рынка в регионе.

Основные компании, представленные в этом отчете, включают Haemonetics Corporation, Fresenius Kabi, Terumo BCT, Inc., Asahi Kasei Medical Co., Ltd., HemaCare Corporation, Kaneka Corporation, Kawasumi Laboratories Inc., Cerus Corporation, B. Braun Melsungen AG, и Nikkiso Co., Ltd. Другие известные игроки в цепочке создания стоимости включают Grifols International SA, Baxter International Inc., CSL Behring, Immucor, Becton, Dickinson & Co., Abbott Laboratories, Medicap и Bioelettronica.

Доступ к ДЕРЕВО ЗНАНИЙ (Премиум по запросу, модель ценообразования на основе подписки) по адресу: https://www.alliedmarketresearch.com/knowledgetree

Дерево знаний — это облачная аналитическая платформа, которая предлагает более 2000 выборочных готовых отчетов по нишевым рынкам, чтобы наши клиенты могли получить глубокое понимание последних тенденций, динамических технологий и новых областей применения. .

Подобные отчеты:

Рынок крови — анализ глобальных возможностей и отраслевой прогноз, 2017-2023 гг.

Рынок производных плазмы крови — анализ глобальных возможностей и отраслевой прогноз, 2016-2023 гг.

О нас

Allied Market Research (AMR) — это подразделение Allied Analytics LLP, предоставляющее полный спектр услуг по исследованию рынка и бизнес-консалтингу, базирующееся в Портленде, штат Орегон. Allied Market Research предоставляет глобальным предприятиям, а также среднему и малому бизнесу непревзойденное качество «Отчетов об исследованиях рынка» и «Решения для бизнес-аналитики».«AMR стремится предоставлять бизнес-идеи и консультации, чтобы помочь своим клиентам в принятии стратегических бизнес-решений и достижении устойчивого роста в соответствующей области рынка.

Мы находимся в профессиональных корпоративных отношениях с различными компаниями, и это помогает нам находить рыночные данные, которые помогают нам составлять точные таблицы данных исследований и подтверждают максимальную точность наших рыночных прогнозов. Все данные, представленные в опубликованных нами отчетах, получены путем первичных интервью с высшими должностными лицами ведущих компаний в соответствующей области.Наша методология получения вторичных данных включает в себя глубокие онлайн- и офлайн-исследования и обсуждения со знающими профессионалами и аналитиками в отрасли.

Контактное лицо:
Шрирам Дигхе
5933 NE Win Sivers Drive
# 205, Портленд, ИЛИ 97220
США
(бесплатно): + 1-800-792-5285
Великобритания: + 44-845-528-1300
Hong Конг: + 852-301-84916
Индия (Пуна): + 91-20-66346060
Факс: + 1⟨855⟩550-5975
[электронная почта защищена]

Интернет: https: // www.alliedmarketresearch.com

ИСТОЧНИК Allied Market Research

питательных веществ | Бесплатный полнотекстовый | Активация образования липидных медиаторов в результате афереза ​​липопротеинов

1. Введение

Современные методы афереза ​​основаны на различных физико-химических принципах очистки крови от липопротеинов. Осаждение используется во время индуцированного гепарином экстракорпорального преципитации липопротеинов низкой плотности (HELP, Futura ^® ), когда отделенная плазма смешивается с буфером ацетат-уксусной кислоты (pH 4.85–5.15) и гепарин. Гепарин связывается с ХС-ЛПНП, холестерином липопротеинов очень низкой плотности (ЛПОНП) и ЛП (а) и из-за кислой среды вместе с фибриногеном образует нерастворимые осадки, которые затем удаляются поликарбонатной мембраной. В системе каскадной фильтрации или мембранной дифференциальной фильтрации (MDF) MONET используется мембрана, удерживающая частицы размером более 1000 кДа, через которые циркулирует плазма после отделения клеточных частей крови.

В то время как HELP и MDF представляют собой процедуры афереза ​​на основе плазмы, при гемоперфузии липопротеинов низкой плотности и прямой абсорбции липопротеиновых систем (например,g., DALI ^® (DA)), цельная кровь циркулирует через адсорбер, который содержит шарики из полиакриламида, покрытые полиакрилатом. Удаление липопротеинов, таких как LDL и Lp (a), происходит путем связывания положительно заряженных областей APO B100 с отрицательными полианионами на поверхности полиакриламида.

Целью настоящего исследования было установить влияние различных методов афереза ​​липопротеинов (HELP, MDF и DA) на n-6 PUFA и n-3 PUFA, а также на образование их липидного медиатора в плазме. Используя газовую хроматографию (ГХ) для анализа жирных кислот и жидкостную хроматографию в сочетании с тандемной масс-спектрометрией (ЖХ-МС / МС), мы смогли показать значительно повышенные уровни различных липоксигеназ (LOX), а также циклооксигеназа (ЦОГ) и фермент цитохрома Р450 (CYP450), производные липидных медиаторов либо из n-6, либо из n-3 ПНЖК, несмотря на снижающий ПНЖК эффект афереза ​​HELP и DA.

4. Обсуждение. . Омега-6 и омега-3 ПНЖК являются важными предшественниками широкого спектра липидных медиаторов, которые действуют как медиаторы в контексте воспаления и сердечно-сосудистых заболеваний [25, 26, 27]. ПНЖК в плазме крови связываются либо в виде свободных жиров. кислоты (СЖК) в альбумин или присутствуют в составе фракции ТГ в виде фосфолипидов и эфиров холестерина липопротеинов [28,29].Недавно мы смогли показать, что концентрация ПНЖК в плазме снижается с помощью методов афереза ​​липопротеинов HELP и DA, используемых для снижения холестерина ЛПНП у пациентов с высоким риском, но не с помощью афереза ​​MDF [21]. Из-за этого эффекта липидный аферез может также препятствовать образованию липидных медиаторов, полученных из ПНЖК. Хотя мы смогли подтвердить наши предыдущие данные, демонстрирующие более низкие количества ПНЖК в плазме из-за липидного афереза ​​HELP и DA, здесь мы показали явное увеличение почти все проанализированные липидные медиаторы и метаболиты после афереза.Наиболее очевидные изменения были обнаружены в образовании метаболитов 15-LOX, происходящих из AA, EPA и DHA, на что указывает значительно повышенные концентрации 15-HETE, 15-HEPE и 17-HDHA, особенно при аферезе MDF, но также и в HELP. и DA. Учитывая, что эти соединения связаны с противовоспалительной активностью [27], это может поддерживать положительный эффект лечения аферезом, который может даже поддерживаться добавлением n-3 ПНЖК. Лечение липопротеиновым аферезом также было связано с активацией 15-LOX, на что указывают повышенные концентрации 15-HETE, 15-HEPE и 17-HDHA.Эти 15-LOX продукты также были связаны с образованием более сложных противовоспалительных медиаторов: 15-HETE, производное от AA, может быть преобразовано в липоксин A4 [30], а производное n-3 DHA 17-гидроксидокозагексаеновой кислоты (17- HDHA), как известно, является предшественником противовоспалительных D-резольвинов [27]. Напротив, образование метаболитов 12-LOX не увеличивалось значительно и оставалось почти постоянным, особенно при аферезе HELP. Этот вывод противоречит нашей гипотезе, основанной на нашем пилотном исследовании [19].Поскольку 12-LOX преимущественно продуцируется тромбоцитами человека, это свидетельствует против активации тромбоцитов из-за афереза ​​HELP. Однако, в то время как метаболиты пути 12-LOX были только умеренно изменены аферезом HELP, MDF и DA вызывали гораздо большее увеличение метаболитов 12-LOX, хотя эти результаты не были значительными (вероятно, из-за небольшого количества образцов). Таким образом, различные методы афереза ​​могут по-разному влиять на активацию тромбоцитов. При аферезе HELP плазма смешивается с буфером ацетат-уксусной кислоты (pH 4.85–5.15) и гепарин. Гепарин связывается с ХС-ЛПНП, ЛПОНП и ЛП (а) и вместе с фибриногеном образует нерастворимые осадки, которые затем удаляются поликарбонатной мембраной. Временная активация тромбоцитов, сопровождающаяся повышенным образованием 12-HETE из-за лечения гепарином, была показана ранее [31]. Напротив, каскадная фильтрация или мембранная дифференциальная фильтрация (MDF) использует мембрану, которая эффективно задерживает частицы размером более 1000 кДа, через которые циркулирует плазма после отделения клеточных частей крови.В то время как HELP и MDF представляют собой системы разделения на основе плазмы, цельная кровь циркулирует через полиакриламидный адсорбер, покрытый полиакрилатом, в процессе гемоперфузии липопротеинов низкой плотности и прямой абсорбции системы липопротеинов (DA) [32]. Для этих систем афереза ​​цельной крови было показано, что шероховатость поверхности полимера активирует адгезию тромбоцитов и активацию клеток [33]. Это может быть объяснением повышенной активации 12-LOX в DA по сравнению с HELP, но не объясняет эффект в MDF.Произведенный из АА 12-НЕТЕ ассоциирован с сосудосуживающими свойствами в мелких почечных артериях, что способствует артериальной гипертензии. Более того, индукция хемотаксиса, агрегации нейтрофилов и ангиогенеза была вовлечена как эффекты 12-HETE [20,34]. В связи с диабетом и гиперлипидемией, активация 12-LOX и образование 12-HETE также вызывают окислительный стресс, а также окисление ЛПНП [34]. В отличие от 12-HETE, производного от n-6 AA, образование 14-HDHA, производного от n-3 DHA, может оказывать защитное действие, поскольку 14-HDHA известен как предшественник противовоспалительных медиаторов [35,36].

Аргументом в пользу провоспалительного эффекта афереза ​​является повышенное образование производных ЦОГ 9-HODE и 11-HETE — эффект, наблюдаемый, хотя почти все пациенты в этом исследовании получали ацетилсалициловую кислоту в низких дозах как часть препарата. их обычных лекарств. Однако влияние на метаболиты ЦОГ, вероятно, не является клинически значимым, поскольку мы не смогли обнаружить простагландины в плазме крови, проанализированной в этом исследовании.

Интересно, что аферез HELP, в частности, привел к более высоким уровням метаболитов LA уже на исходном уровне. Это наблюдение требует дальнейшего изучения, так как оно может указывать на устойчивую активацию образования метаболитов LA у пациентов, проходящих регулярное лечение аферезом HELP, но не у пациентов, проходящих лечение MDF или DA.

Ограничением этого исследования является небольшое количество людей в каждой группе лечения, что может повлиять на достоверность наших данных. Тем не менее, мы считаем, что наши данные являются достоверными и значимыми, особенно благодаря нашему вниманию к большей группе пациентов с аферезом HELP. Однако, учитывая небольшое количество выборок, мы решили не вносить поправки для множественного тестирования, что является ограничением данного исследования. Настоящее исследование не отвечает на вопросы, касающиеся долгосрочных эффектов различных и повторных процедур афереза ​​на ПНЖК и липидные медиаторы, и не учитывает различия в диетических добавках ПНЖК n-3 и n-6, особенно в контексте регулярного лечения аферезом. и последующие изменения уровня липопротеинов.В будущих исследованиях необходимо будет рассмотреть эти вопросы, а также определить липидные метаболиты в конкретных фракциях липопротеинов (например, ЛПОНП, ЛПНП, ЛПВП).

Динеш К. Чхетри, MD | Отоларингология

Д-р Динеш Чхетри — профессор хирургии головы и шеи и ларинголог, специалист в области нарушений голоса, глотания и дыхательных путей. Он с отличием окончил Университет Брауна со степенью в области биохимии, затем получил степень доктора медицины в Медицинской школе Калифорнийского университета в Лос-Анджелесе, которую окончил с отличием за диссертацию по параличу голосовых складок и реиннервации гортани.Он остался в Калифорнийском университете в Лос-Анджелесе для прохождения резидентуры по отоларингологии — хирургии головы и шеи и стажировки в ларингологии.

Доктор Чхетри известен на национальном и международном уровне как академический ларинголог и хирург головы и шеи. Он является автором почти 100 публикаций, связанных с нарушениями голоса и глотания. Национальные институты здоровья (NIH) постоянно финансируют его исследования в области нервно-мышечного контроля гортани и нарушений голоса. Он проявляет особый интерес к уходу за теми, кто в своей профессии полагается в первую очередь на голос (уход за профессиональным голосом), параличом голосовых связок, неврологическими проблемами голоса, а также доброкачественными и злокачественными образованиями гортани и окружающих структур, вызывающими голос, глотание. , и проблемы с дыханием.

Доктор Чхетри также является международным авторитетом в области нарушений глотания, опубликовав основополагающую книгу «Оценка и лечение дисфагии в отоларингологии» и прочитав множество приглашенных лекций по всему миру о нарушениях глотания, связанных с нейрогенными и обструктивными причинами, а также лучевой терапии. при раке головы и шеи. Он также имеет сертификат по трансоральной роботизированной хирургии (TORS) при раке головы и шеи.

Доктор Чхетри в настоящее время является заместителем председателя отделения хирургии головы и шеи UCLA, директором программы UCLA по расстройствам глотания и программы UCLA по борьбе с раком головы и шеи, а также содиректором программы по ларингологии.Он также является волонтером на внешнем уровне в качестве члена совета Американской ларингологической ассоциации и рецензента по грантам Национального института здоровья. Кроме того, он увлечен обучением хирургов по всему миру и возглавлял множество международных медицинских миссий в Южной Азии.

Назначения академического персонала

Профессор-резидент отделения хирургии головы и шеи Медицинской школы Дэвида Геффена, Калифорнийский университет в Лос-Анджелесе

Назначения медицинского персонала Голос, дыхательные пути, глотание

Профессиональное членство

• Американское акустическое общество (ASA)
• Американская академия отоларингологии — хирургия головы и шеи (AAO-HNS)
• Американская бронхоэзофагологическая ассоциация
• (ABEA) Американский колледж хирургов (ACS)
• Американское общество головы и шеи (AHNS)
• Американская ларингологическая ассоциация (ALA)
• Триологическое общество

% PDF-1.7 % 7782 0 объект > эндобдж xref 7782 206 0000000016 00000 н. 0000009261 00000 п. 0000009555 00000 н. 0000009601 00000 п. 0000009638 00000 н. 0000010334 00000 п. 0000010449 00000 п. 0000010488 00000 п. 0000013721 00000 п. 0000015956 00000 п. 0000018710 00000 п. 0000021591 00000 п. 0000023775 00000 п. 0000023890 00000 п. 0000026951 00000 п. 0000027317 00000 п. 0000027946 00000 н. 0000028041 00000 п. 0000028368 00000 п. 0000028951 00000 п. 0000029612 00000 п. 0000029926 00000 н. 0000033527 00000 п. 0000036900 00000 п. 0000038036 00000 п. 0000040686 00000 п. 0000045788 00000 п. 0000045903 00000 п. 0000046028 00000 п. 0000084705 00000 п. 0000084746 00000 п. 0000085109 00000 п. 0000085208 00000 п. 0000085357 00000 п. 0000085745 00000 п. 0000086133 00000 п. 0000086256 00000 п. 0000086413 00000 п. 0000086490 00000 н. 0000087329 00000 н. 0000127880 00000 н. 0000128243 00000 н. 0000128320 00000 н. 0000129159 00000 н. 0000161822 00000 н. 0000162187 00000 н. 0000162263 00000 н. 0000162339 00000 н. 0000162415 00000 н. 0000162809 00000 н. 0000163196 00000 н. 0000163272 00000 н. 0000163348 00000 н. 0000163744 00000 н. 0000164128 00000 н. 0000164204 00000 н. 0000164280 00000 н. 0000165005 00000 н. 0000165811 00000 н. 0000165887 00000 н. 0000165963 00000 н. 0000166712 00000 н. 0000167530 00000 н. 0000167606 00000 н. 0000167682 00000 н. 0000168077 00000 н. 0000168465 00000 н. 0000168541 00000 н. 0000168617 00000 н. 0000169012 00000 н. 0000169405 00000 н. 0000169481 00000 н. 0000169557 00000 н. 0000169951 00000 н. 0000170335 00000 н. 0000170411 00000 п. 0000170487 00000 н. 0000170880 00000 н. 0000171284 00000 н. 0000171360 00000 н. 0000171436 00000 н. 0000171928 00000 н. 0000172435 00000 н. 0000172511 00000 н. 0000172587 00000 н. 0000172976 00000 н. 0000173358 00000 н. 0000173434 00000 н. 0000173510 00000 н. 0000174040 00000 н. 0000174593 00000 н. 0000174669 00000 н. 0000174745 00000 н. 0000175137 00000 н. 0000175516 00000 н. 0000177368 00000 н. 0000177444 00000 н. 0000178232 00000 н. 0000178308 00000 н. 0000178828 00000 н. 0000178904 00000 н. 0000178980 00000 н. 0000179056 00000 н. 0000179452 00000 н. 0000179838 00000 н. 0000179914 00000 н. 0000179990 00000 н. 0000180387 00000 н. 0000180776 00000 н. 0000180852 00000 н. 0000180928 00000 н. 0000181678 00000 н. 0000182504 00000 н. 0000182580 00000 н. 0000182656 00000 н. 0000183053 00000 н. 0000183440 00000 н. 0000183516 00000 н. 0000183592 00000 н. 0000183989 00000 н. 0000184375 00000 н. 0000184451 00000 н. 0000184527 00000 н. 0000184921 00000 н. 0000185300 00000 н. 0000185376 00000 н. 0000185452 00000 н. 0000185846 00000 н. 0000186226 00000 н. 0000186302 00000 н. 0000186378 00000 н. 0000186874 00000 н. 0000187392 00000 н. 0000187468 00000 н. 0000187544 00000 н. 0000188071 00000 н. 0000188631 00000 н. 0000188707 00000 н. 0000188783 00000 н. 0000189153 00000 н. 0000189504 00000 н. 0000189580 00000 н. 0000189656 00000 н. 00001 00000 н. 0000191191 00000 н. 0000193028 00000 н. 0000193104 00000 н. 0000193912 00000 н. 0000193988 00000 н. 0000194064 00000 н. 0000194140 00000 н. 0000194536 00000 н. 0000194918 00000 н. 0000194994 00000 н. 0000195070 00000 н. 0000195503 00000 н. 0000195943 00000 н. 0000196019 00000 н. 0000196095 00000 н. 0000196520 00000 н. 0000196946 00000 н. 0000197022 00000 н. 0000197098 00000 н. 0000197599 00000 н. 0000198113 00000 н. 0000198189 00000 н. 0000198265 00000 н. 0000198761 00000 н. 0000199279 00000 н. 0000199355 00000 н. 0000199431 00000 н. 0000200132 00000 н. 0000200899 00000 н. 0000200975 00000 н. 0000201051 00000 н. 0000201832 00000 н. 0000202722 00000 н. 0000204566 00000 н. 0000204642 00000 н. 0000204718 00000 н. 0000204794 00000 н. 0000205259 00000 н. 0000205771 00000 н. 0000205847 00000 н. 0000205923 00000 н. 0000206389 00000 н. 0000206883 00000 н. 0000206959 00000 н. 0000207035 00000 н. 0000207644 00000 н. 0000208296 00000 н. 0000208372 00000 н. 0000208448 00000 н. 0000209066 00000 н. 0000209733 00000 н. 0000209809 00000 н. 0000209885 00000 н. 0000210612 00000 п. 0000211422 00000 н. 0000211498 00000 н. 0000211574 00000 н. 0000212320 00000 н. 0000213153 00000 п. 0000214960 00000 н. 0000008956 00000 н. 0000004505 00000 н. трейлер ] / Назад 1271637 / XRefStm 8956 >> startxref 0 %% EOF 7987 0 объект > поток hYyXSW ڿ 熰 HAAL $! l®,! dc 6d’DnUS; ZT @ E- * E: tν) = ly AALg # yq

? Z $ @

Плазмаферез при кожных заболеваниях | DermNet NZ

Автор: Брайан Ву, кандидат медицинских наук, Медицинская школа Кека, Лос-Анджелес, США.Главный редактор DermNet New Zealand: достопочтенный A / профессор Аманда Окли, дерматолог, Гамильтон, Новая Зеландия. Редактор: Мария МакГиверн / Гас Митчелл. Июль 2017.

Что такое плазмаферез?

Термин «плазмаферез» описывает процедуру, при которой компоненты крови (т. Е. Лейкоциты, эритроциты, тромбоциты и плазма) разделяются через центральную внутривенную линию с широким отверстием, либо с помощью центрифуги, либо с помощью метода разделения с полупроницаемой мембраной. Его можно повторять несколько раз каждые несколько дней.

При терапевтическом плазмаферезе (также известном как плазмаферез) с использованием центрифуги:

• 3–6 литров фильтрованной плазмы удаляются в течение нескольких часов
• Эритроциты и замещающая жидкость (донорская плазма или альбумин) возвращаются пациенту.

Для сравнения, плазмаферез методом мембранного разделения:

• Используются различные типы фильтров
• Удаляет нежелательные макромолекулы
• Возвращает обработанную плазму пациенту.

Обмен плазмой также может включать:

• Переливание замещающих белковых продуктов, таких как индивидуальные факторы свертывания крови
• Цитаферез (избирательное удаление клеток крови), более конкретно эритроцитаферез (удаление эритроцитов), лейкаферез (удаление лейкоцитов) или тромбоцитаферез (удаление тромбоцитов).

Для чего используется плазмаферез?

Плазмаферез удаляет аутоантитела, иммунные комплексы, комплемент и неспецифические медиаторы воспаления.Он в основном используется при тяжелых аутоиммунных или цитотоксических заболеваниях.

Используется при различных гематологических, ревматологических, метаболических, дерматологических, неврологических и почечных заболеваниях. Клинические данные убедительнее всего в пользу использования плазмафереза ​​при синдроме Гийена – Барре, миастении, тромботической тромбоцитопенической пурпуре, синдроме Гудпасчера и молниеносной болезни Вильсона.

Плазмаферез в дерматологии применяется нечасто; используется в основном экспериментально при следующих заболеваниях:

Кожные заболевания, которые иногда лечат с помощью плазмафереза ​​

Какие противопоказания к плазмаферезу?

Плазмаферез противопоказан пациентам, которые:

• Слишком плохо себя чувствуют, чтобы переносить процедуру
• Есть склонность к кровотечению
• Плохой венозный доступ
• Вы принимаете определенные лекарства (например, ингибиторы АПФ, которые могут вызывать гипотонию, приливы крови и другие осложнения)
• Наличие в анамнезе определенных заболеваний (например, гипокальциемии)
• Есть определенные аллергии (например, на свежезамороженную плазму, альбумин или гепарин).

Каковы преимущества плазмафереза?

Теоретические преимущества плазмафереза ​​при лечении кожных заболеваний включают:

• Удаление аутоантител, ответственных за кожное заболевание
• Отсутствие иммуносупрессивного действия
• Иммунокорригирующее действие, возможно, из-за активации макрофагов
• Улучшение микроциркуляции
• Нормализация гемостаза
• Эффекты, которые могут длиться от нескольких недель до месяцев.

Какие недостатки плазмафереза?

Плазмаферез не используется. Он не является широко доступным, поскольку требует наличия команды опытных врачей, и поэтому его выполнение дорого.

Каковы побочные эффекты плазмафереза?

Осложнения и риски плазмафереза ​​могут включать:

• Трансфузионные реакции, включая анафилаксию
• Гипокальциемия и / или гипомагниемия
• Гипотермия
• Гипотония
• Кровотечение из-за потребления факторов свертывания
• Пневмоторакс
• Инфекция
• Легочная эмболия.

Список литературы

• Бакон Р. ВВИГ или плазмаферез при нервно-мышечных заболеваниях: за и против. Медицинский центр Канзасского университета, апрель 2014 г. (по состоянию на 28 ноября 2016 г.).
• Гребенников В.А., Беляевский А.Д., Каминский М.И., Кузина З.А., Литвиненко Т.А. [Иммунокорригирующее и детоксицирующее действие гемосорбции, плазмафереза ​​и энтеросорбции при пузырчатке]. Вестн Дерматол Венерол 1990; (5): 33–8. Русский. PubMed
• Павенски К., Ванденберге Х., Якубович Х., Адам Д.Н., Гарви Б., Штрейткер С.Дж.Плазмаферез и лечение стероидами васкулопатии, вызванной левамизолом, и связанного с ней некроза кожи у потребителей крэка / кокаина. J Cutan Med Surg 2013; 17: 123–8. DOI: 10.2310 / 7750.2012.12028. PubMed
• Потекаев Н.С., Курдина М.И., Орлов С.Л. и др. [Плазмаферез в дерматологии]. Тер Арх 1991; 63 (10): 133–8. Русский. PubMed
• Штиглиц Э. Плазмаферез. Medscape. Обновлено 2016 г. (по состоянию на 22 ноября 2016 г.).
• Плазмаферез: эффективное лечение. Лечебный аферез для дерматологии.Доступно по адресу: https://tinyurl.com/yc7qwvnc (по состоянию на 22 ноября 2016 г.).

В DermNet NZ

Другие веб-сайты

Книги о кожных заболеваниях

См. Книжный магазин DermNet NZ.

Метаболомика и протеомика выявляют изменение веществ в тромбоцитах афереза ​​во время хранения и их влияние на пролиферацию раковых клеток — FullText — Transfusion Medicine and Hemotherapy 2021, Vol. 48, № 2

Аннотация

Введение: Тромбоциты афереза ​​(AP) клинически и критически важны для профилактики и лечения кровотечений у пациентов с тромбоцитопенией или раком.Однако немногие исследователи изучали изменение метаболитов надосадочной жидкости и белков экзосом в AP во время хранения и их влияние на пролиферацию раковых клеток. Цель: Это исследование было разработано для изучения правил изменения метаболитов и экзосомальных белков AP во время хранения и их влияния на пролиферацию раковых клеток. Методы: Метаболомику и протеомику применяли по отдельности для анализа вариации метаболитов в супернатанте АР и экзосомальных белков между свежеприготовленными АР с нулевым и пятым днями хранения на концах.Набор для подсчета клеток (CCK) -8 был проведен для обнаружения эффектов AP супернатантов и экзосом на пролиферацию раковых клеток. Результаты: Мы обнаружили, что метаболиты надосадочной жидкости и экзосомальные белки в AP значительно различались в день 0 и день 5, и что многие дифференциальные метаболиты и экзосомальные белки были связаны с характеристиками рака. Кроме того, супернатанты AP дня 5 имели большее ингибирование пролиферации раковых клеток K562, HepG2 и HCT116, но экзосомы AP дня 5 не оказывали значительного влияния на пролиферацию этих раковых клеток. Заключение: Варианты супернатантов концевых АР могут ингибировать пролиферацию раковых клеток, но вариантные экзосомы концевых АР не влияют на пролиферацию раковых клеток.

© 2020 S. Karger AG, Базель

Введение

Переливание аферезных тромбоцитов (AP) в качестве потенциальной терапии для спасения жизни обычно используется при лечении кровотечений, связанных с тромбоцитопенией.Между тем, AP играют важную роль в эффективном лечении тромбоцитопении, вызванной злокачественными новообразованиями или осложнениями, связанными с химиотерапией, и они предотвращают кровотечение у пациентов с гематологическими нарушениями после трансплантации стволовых клеток [1, 2].

Однако в большинстве регионов, включая Китай, AP могут храниться только до 5 дней, в первую очередь из-за повышенного риска бактериального заражения, хотя некоторые исследования показали, что концентраты тромбоцитов могут храниться до 7 дней [3, 4 ].Кроме того, во время хранения AP могут возникать повреждения накопления тромбоцитов (PSL), сопровождающиеся множественными изменениями, включая повышенное высвобождение внеклеточных везикул тромбоцитов (P-EV), снижение активации в ответ на агонисты, усиление апоптоза и экстернализации фосфатидилсерина и секрецию тромбоцитов. гранулы [5]. Они могут повлиять на функциональную целостность тромбоцитов и вызвать другие побочные эффекты. Исследования показывают, что P-EV, включая экзосомы тромбоцитов (30–100 нм в диаметре) и микровезикулы тромбоцитов (100–1000 нм в диаметре) [6, 7], играют жизненно важную роль в управлении нарушениями иммунной системы человека. , например, снижение функции естественных клеток-киллеров [8] и ингибирование продукции IL-17 регуляторными Т-клетками [9].Интересно, что были исследования, показывающие, что микровезикулы тромбоцитов, являясь частью P-EV, участвуют в регуляции рака [10, 11]. Все эти исследования показывают, что изменения веществ в растворах АР во время хранения могут способствовать серьезным побочным эффектам переливания тромбоцитов; это требует большего внимания со стороны клиницистов и исследователей.

Существуют исследования, которые показывают транскриптомный профиль терминальных тромбоцитов и P-EV [12], а также изменение белкового состава тромбоцитов человека во время хранения при различных температурах [13].Тем не менее, как вещества изменяются между свежеприготовленными АР, хранящимися на терминале 0-го и 5-го суток, остается в значительной степени неизвестным. Что еще более важно, эффекты супернатантов АР и экзосом дней 0 и 5 на пролиферацию раковых клеток еще неясны. Для дальнейшего изучения изменений метаболитов в супернатантах AP и белков в экзосомах AP во время хранения, в этом исследовании использовались метаболомика и протеомика для анализа, соответственно, изменения метаболитов в хранимых супернатантах AP и белков в экзосомах, полученных из тромбоцитов, между свежеприготовленными днями 0. и AP, хранящиеся в терминале на 5-й день.Также было обнаружено влияние супернатантов AP и экзосом на пролиферацию раковых клеток.

Материалы и методы

Сбор AP

В Главном госпитале Народно-освободительной армии Китая (PLA) AP были получены от 10 здоровых доноров крови мужского пола, средний возраст которых составил 33,8 года, в соответствии с «Требованиями к медицинскому освидетельствованию». доноров крови »(Китай, GB 18467–2011).

Выделение супернатантов АР и экзосом

Супернатанты АР получали центрифугированием АР, хранящихся в день 0 и день 5, сначала при 2000 г в течение 30 минут при комнатной температуре, а затем при 10000 г в течение 30 минут при 4 ° С.Супернатанты AP хранили при –80 ° C, если они не использовались. Супернатанты AP центрифугировали при 105000 g и 4 ° C в течение 2 часов для получения первичных экзосом AP (осадок) и супернатантов без экзо-AP (супернатант). Впоследствии первичные экзосомы, экстрагированные из 30 мл супернатанта AP, ресуспендировали в 1 мл PBS, а затем фильтровали через фильтр с размером пор 0,22 мкм (Millipore; США). После фильтрации первичные экзосомы AP снова ультрацентрифугировали при 105000 g и 4 ° C в течение 2 часов для получения дополнительных очищенных экзосом.Наконец, экзосомы AP ресуспендировали в 300 мкл PBS и хранили при –80 ° C. Экзосомы AP идентифицировали с помощью вестерн-блоттинга и просвечивающей электронной микроскопии (ТЕМ).

Методы исследования метаболизма супернатанта АР

Экстракция метаболитов

Все образцы супернатанта АР размораживали на льду, а затем 300 мкл предварительно охлажденного буфера для экстракции (метил-трет-бутиловый эфир [МТБЭ]: метанол = буфер 20: 6). смешали с 20 мкл образцов. Затем смесь встряхивали в течение 2 минут, а затем инкубировали при комнатной температуре в течение 10 минут.Затем экстракционную смесь хранили в течение ночи при –80 ° C. После центрифугирования экстракционной смеси при 12000 g в течение 5 минут супернатант переносили в новые 96-луночные планшеты и хранили при –80 ° C до проведения анализа методом жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии (ЖХ-МС). Кроме того, образцы для контроля качества (QC) также были приготовлены путем объединения 10 мкл каждой экстракционной смеси.

Анализ ЖХ-МС

Все образцы были получены с помощью системы ЖХ-МС в соответствии с рекомендациями производителя.Во-первых, все хроматографические разделения были выполнены с использованием высокопроизводительной системы ЖХ (UPLC) (Shimazu, Япония). Колонку ACQUITY UPLC C18 (100 × 2,1 мм, 1,7 мкм, Waters, UK) использовали для обращенно-фазового разделения. В термостате колонки поддерживали температуру 40 ° C со скоростью потока 0,3 мл / мин, а подвижная фаза состояла из растворителя A (40% воды, 60% ACN и 10 мМ ацетата аммония) и растворителя B (10% ACN и 90% 2-изопропанол). Были установлены следующие условия градиентного элюирования: 0–0,5 мин, 20% B; 0.5–1,5 мин, 20–40% B; 1,5–10 мин, 40–60% B; 10–25 мин, 60–100% B; 25–26 мин, 100–20% B; 26–30 мин, 20% B. Вводимый объем каждой пробы составлял 1 мкл.

Тандемный масс-спектрометр высокого разрешения TripleTOF 6600 (SCIEX, Великобритания) использовали для обнаружения метаболитов, элюированных из колонки. Q-TOF работал как в режиме положительных, так и отрицательных ионов. Газ завесы был установлен на 35 фунтов на квадратный дюйм, газ источника ионов 1 на 60 фунтов на квадратный дюйм и газ источника ионов 2 на 60 фунтов на квадратный дюйм; температура нагревателя интерфейса составляла 550 ° C. Плавающее напряжение IonSpray Voltage Floating было установлено на уровне 5 500 В в режиме положительных ионов и –4 500 В в режиме отрицательных ионов.Данные MS были получены в режиме информационно-зависимого сбора данных (IDA). Диапазон масс TOF составлял 240–1250 Да. Обзорные сканирования были получены за 250 мс, и было собрано до 10 сканирований ионов продуктов, если был превышен порог в 100 импульсов в секунду. Общее время цикла было зафиксировано на 1,3 с. Четыре временных интервала суммировались для каждого сканирования при значении частоты генератора импульсов 11 кГц путем мониторинга 40-ГГц многоканального детектора TDC с детектированием 4 анодов / каналов. Во время сбора точность измерения массы калибровалась каждые 10 образцов.Чтобы оценить стабильность ЖХ-МС в течение всего сбора данных, образец для контроля качества собирали после каждых 10 образцов.

Анализ данных метаболизма

Сбор исходных данных МС о предварительных обработках выполняли с использованием программного обеспечения XCMS. Файлы необработанных данных ЖХ-МС были преобразованы в формат mz XML, а затем обработаны с помощью инструментов XCMS, CAMERA и metaX, реализованных с помощью программного обеспечения R . Параметры пикового захвата задавались следующим образом: method: centWave; minfrac: 0.5; snthr: 6; частей на миллион: 25; ширина пика: 5, 25; bw2: 5; mz ширина: 0,015; mz разница: 0,01; profstep.OBIWarp: 0.1. Каждый ион был идентифицирован путем объединения данных о времени удерживания (RT) и m / z . Регистрировали интенсивности каждого пика и генерировали трехмерную матрицу, содержащую произвольно назначенные индексы пиков (время удерживания — м / z пар), названия образцов (наблюдения) и информацию об интенсивности ионов (переменные).

Онлайн-базы данных LIPID Metabolites and Pathways Strategy (LIPID MAPS), Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) и База данных Human Metabolome (HMDB) использовались для аннотирования первичных метаболитов путем сопоставления точных данных молекулярной массы ( m / z ) образцов с образцами из базы данных.Если разница в массе между наблюдаемым значением и значением из базы данных была <10 ppm, метаболит будет аннотирован, а молекулярная формула метаболитов будет дополнительно идентифицирована и подтверждена измерениями распределения изотопов. Мы также использовали собственную библиотеку спектра фрагментов метаболитов для подтверждения идентификации метаболитов (вторичные аннотированные метаболиты).

Интенсивность пиковых данных дополнительно обрабатывалась с помощью собственного программного обеспечения metaX. Те особенности, которые были обнаружены в <50% образцов QC или <80% биологических образцов, были удалены, а оставшиеся пики с пропущенными значениями были вычислены с помощью алгоритма k-NN (k-ближайшего соседа) для дальнейшего улучшения качества данных.Анализ главных компонентов (PCA) был проведен для обнаружения выбросов (за пределами распределения t с 95% доверительным интервалом) и оценки пакетных эффектов с использованием предварительно обработанного набора данных. Частичный дискриминантный анализ методом наименьших квадратов (PLS-DA) был проведен с помощью metaX, чтобы различать различные переменные между группами. R 2 x , R 2 y и Q 2 были использованы для оценки эффекта подгонки модели PLS-DA. R 2 x и R 2 y представляют собой проценты информации матрицы X и Y , соответственно, которые могут быть интерпретированы.Значение Q 2 может быть получено путем вычисления перекрестной проверки. Чем больше балл R 2 и Q 2, тем лучше эффект прогнозирования и тем больше степень разделения двух групп выборок на фигуре, что указывает на значимость эффекта классификации. Основанная на контроле качества надежная коррекция сигнала LOESS была адаптирована к данным контроля качества относительно порядка ввода, чтобы минимизировать дрейф интенсивности сигнала во времени. Кроме того, относительные стандартные отклонения метаболических характеристик были рассчитаны для всех образцов QC, и те> 30% были удалены.

Вестерн-блот-анализ